Flujo de trabajo:  Producción de plásmidos
 
Ensamblaje

Ensamblaje

El gen diana (gen de interés) está ligado en un vector con las características deseadas, formando parte de un plásmido recombinante. Esto puede realizarse a través de diferentes técnicas, que incluyen el ensamblaje Gibson o el ensamblaje Golden Gate.

Flujo de trabajo de ensamblaje
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Transformación
Flujo de trabajo de transformación

Transformación

Los productos de ligación se introducen en células bacterianas competentes, lo que permite al microorganismo la captación del plásmido modificado por ingeniería y la producción de múltiples copias del plásmido.

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Siembra en placas y cribado de colonias

Siembra en placas y cribado de colonias

Las células microbianas se extienden sobre placas de agar sólido para que crezcan en colonias individuales y, posteriormente, se realiza un cribado para identificar aquellas colonias que tienen las características deseadas y seleccionarlas.

Siembra en placas y cribado de colonias
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>Selector de colonias microbianas QPix

Selector de colonias microbianas QPix

Selección de colonias

Selección de colonias

Una vez identificadas las colonias deseadas, estas pueden seleccionarse a partir de las placas de agar y transferirse a medio líquido para su cultivo e incubación durante toda la noche.

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Incubación durante toda la noche

Incubación durante toda la noche

Las placas de cultivo con medio líquido se sellan y se transfieren a incubadores con agitación para permitir que los microorganismos se dividan y produzcan de este modo más copias del plásmido recombinante.

Incubación durante toda la noche
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adición del sustrato
adición del sustrato

Mini Prep

Los microorganismos se lisan para extraer los plásmidos recombinantes. Posteriormente, se purifican los plásmidos mediante una columna o con métodos basados en microesferas para obtener ADN de una alta pureza.

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