Cambio de la señal del flujo de calcio
El Fura-2 unido a calcio se excita a 340/510 nm y la forma no unida se excita a 380/510 nm. Tras el flujo de calcio, la concentración de calcio en el citoplasma aumenta, lo que provoca que la intensidad de fluorescencia a 340/510 nm aumente de forma proporcional. Por el contrario, la intensidad a 380/510 nm disminuye en sincronización con la disminución de la concentración de colorante no unido. Mediante el cálculo del cociente entre las intensidades de fluorescencia producidas por la excitación a las dos longitudes de onda, se minimizan los artefactos asociados con la distribución irregular del colorante y la variación en el número de células, ya que afectan por igual a ambas mediciones.