Kit EarlyTox Cardiotoxicity
El kit EarlyTox™ Cardiotoxicity proporciona un método de fluorescencia rápido, simple y fiable para identificar compuestos cardiotóxicos en un ensayo biológicamente relevante utilizando cardiomiocitos derivados de células madre. Aprovechando nuestra tecnología de enmascaramiento patentada con nuestro nuevo indicador sensible al calcio, los investigadores pueden:
- Eliminar compuestos cardiotóxicos e identificar posibles candidatos a fármacos
- Medir 384 muestras en minutos en lugar de horas
- Minimizar el efecto inespecífico del colorante sobre las características del latido
- Reducir la variación entre pocillos y mejorar la calidad de los datos
- El rango dinámico de señal más grande disponible
- Comparación con tres compuestos de referencia: isoproterenol, sotalol y propranolol
Datos del kit EarlyTox Cardiotoxicity
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Comparación de compuestos de referencia sobre la frecuencia de latido de cardiomiocitos
(A) Cambio de la señal de calcio en cardiomiocitos derivados de iPSC no tratados incubados durante dos horas con el colorante EarlyTox Cardiotoxicity indicado por los picos máximos de calcio. (B) El propranolol ralentiza la frecuencia máxima de calcio en células derivadas de iPSC. (C) El isoproterenol aumenta la frecuencia máxima de calcio en cardiomiocitos derivados de iPSC. (D) El sotalol ralentiza la frecuencia máxima de calcio en cardiomiocitos derivados de iPSC y altera el patrón normal.
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Comparación de la frecuencia de latido
Las frecuencias de latido se registraron durante un periodo de cuatro horas. El colorante EarlyTox Cardiotoxicity presentaba la frecuencia de latido más alta en todos los pocillos.
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Impacto del colorante sobre la amplitud máxima promedio
A lo largo del tiempo, el colorante EarlyTox Cardiotoxicity presentaba la amplitud máxima promedio más alta. La señal de los demás colorantes disminuyó con el tiempo.
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Comparación del impacto del colorante sobre el latido de cardiomiocitos a lo largo del tiempo
Se compararon 34 pocillos de control con cada colorante durante un periodo de cuatro horas. Todos los pocillos de colorante EarlyTox Cardiotoxicity mantuvieron el latido hasta cuatro horas. Las células de los pocillos de Fluo-4 Direct y del kit FLIPR Calcium 5 dejaron de latir mucho antes y prácticamente todas habían dejado de hacerlo a las cuatro horas.
Tecnología del kit EarlyTox Cardiotoxicity
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Los kits EarlyTox™ Cardiotoxicity proporcionan una solución homogénea para predecir la toxicidad y eficacia de los compuestos
Los kits EarlyTox Cardiotoxicity utilizan un colorante sensible al calcio que se absorbe en el citoplasma de las células durante la incubación. Cuando el colorante se une a los iones de calcio en el citoplasma de la célula, la intensidad de fluorescencia aumenta, lo que permite medir cualquier cambio en la concentración de calcio. La tecnología de enmascaramiento no penetra en la célula, sino que reduce la fluorescencia de fondo extracelular. Esto ayuda a mejorar la ventana de señal del ensayo, proporcionando más detalle para los patrones de latido.
Función del calcio en el mecanismo de contracción-relajación de cardiomiocitos
El kit EarlyTox Cardiotoxicity se puede utilizar para caracterizar el impacto de compuestos farmacológicos sobre la frecuencia máxima (LPM), amplitud máxima y patrón de latido y se ha diseñado para trabajar con cardiomiocitos derivados de células madre o cardiomiocitos primarios. Las frecuencias máximas se determinan a partir de los cambios en la concentración de calcio intracelular monitorizada mediante el colorante EarlyTox Cardiotoxicity. La función del calcio en la contracción-relajación de cardiomiocitos incluye: 2,1. Se produce la despolarización de la membrana, los canales de calcio se abren y el calcio entra en el citoplasma. 2,2. El calcio intracelular desencadena la liberación del calcio a partir del retículo endoplásmico. 2,3. El calcio citoplásmico se una a la troponina y activa el sarcómero. 2,4. Se produce la concentración del cardiomiocito. 2,5. Eliminación de calcio mediante transporte activo hacia el retículo sarcoplásmico e intercambio de calcio con el líquido extracelular. 2,6. Se repite el ciclo.
Recursos del kit EarlyTox Cardiotoxicity
Nota de aplicación
Ensayo de flujo de calcio para estudios de neurotoxicidad in vitro y detección de drogas
Calcium flux assay for in vitro neurotoxicity studies and drug screening
La adquisición de imágenes de calcio o la monitorización de los cambios en el calcio intracelular, son unas técnicas extremadamente útiles para investigar las diferentes funciones que tienen los iones de calcio en el funcionamiento de las neuronas...
eBook
Ensayos optimizados para una investigación pionera
Optimized Assays for Breakthrough Research
La investigación en biología se ha simplificado considerablemente gracias a la disponibilidad de kits de ensayo, instrumentos y protocolos de ensayo estandarizados de fabricantes comerciales.
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Nota de aplicación
Ensayos multiparamétricos para cardiomiocitos en una única plataforma
Multiparametric assays for cardiomyocytes on a single platform
Recientemente se ha demostrado que los cambios en el flujo de calcio intracelular asociado a las contracciones de los cardiomiocitos se pueden monitorizar en un lector de placas con adquisición de imágenes de fluorescencia (sistema FLIPR...
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Nota de aplicación
El kit EarlyTox Cardiotoxicity proporciona datos de cardiotoxicidad biológicamente relevantes en fases más tempranas del proceso de descubrimiento de fármacos.
EarlyTox Cardiotoxicity Kit provides biologically relevant cardiotoxicity data earlier in the drug discovery process
El kit EarlyTox Cardiotoxicity contiene un nuevo colorante sensible al calcio y una tecnología de enmascaramiento patentada optimizada para medir cambios en el calcio citoplásmico que se asocian...
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Nota de aplicación
Efectos de compuestos sobre los transitorios de calcio en cardiomiocitos pulsátiles derivados de iPSC humanos Cor.4U de Axiogenesis
Compound effects upon calcium transients in beating Axiogenesis Cor.4U human iPS cell-derived cardiomyocytes
La evaluación de la cardiotoxicidad es importante en las primeras fases del descubrimiento de fármacos para poder eliminar del proceso de desarrollo los compuestos potencialmente tóxicos. Esto es crítico para...
Nuevas herramientas de ensayos in vitro para descubrimiento y toxicidad cardíaca
