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Kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP
La señalización celular a través de receptores acoplados a proteína G (GPCR) se puede evaluar monitorizando los efectores posteriores, el calcio y el AMP cíclico (cAMP). La monitorización de los niveles de cAMP, un segundo mensajero producido en respuesta a la activación de la adenilato ciclasa, es una de las vías más importantes para el cribado de agonistas y antagonistas de los GPCR.
Kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP
Los reactivos de alta afinidad del kit de ensayo fluorescente de cAMP se han optimizado para proporcionar sensibilidad y precisión en aplicaciones en las que los niveles de cAMP son bajos. En un único paso de lavado se elimina el material no unido antes del paso de desarrollo, por lo que el ensayo es muy resistente a las interferencias debidas a compuestos problema con color o fluorescentes. El sustrato Stoplight Red patentado se utiliza para generar una lectura de fluorescencia estable, lo que permite leer el ensayo en tan solo 10 minutos o hasta 24 horas después de la adición del sustrato.
Ventajas del kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP:
- Los reactivos de alta afinidad se han optimizado para proporcionar sensibilidad cuando los niveles de cAMP son bajos, lo que garantiza resultados cuando otros ensayos no pueden.
- El sólido formato resiste las interferencias debidas a compuestos con color o fluorescentes, lo que mejora la fiabilidad de los resultados.
- El rápido desarrollo de la señal (<10 min) y la ausencia de un paso de terminación proporcionan a los usuarios un tiempo de lectura flexible que es compatible con la automatización y el cribado de alto rendimiento.
- El método cuantitativo permite la determinación exacta del cAMP en las muestras.
Datos del kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP
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Curva de calibración de cAMP
La curva de calibración para el kit de ensayo CatchPoint® cAMP se generó en un lector de microplacas multimodo SpectraMax® M5. Los datos se obtuvieron 24 horas después de la adición del sustrato Stoplight Red. La EC50 de la curva de calibración de cAMP fue de 5,1 nM.
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Respuesta en función de la dosis de forskolina en células HEK293
Se estimularon 10 000 células en un volumen de 20 µl durante 15 minutos y, a continuación, se lisaron y analizaron usando el kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP. Los datos se generaron en un lector de microplacas multimodo SpectraMax M5.
Tecnología del kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP
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Principio del ensayo CatchPoint cAMP
El cAMP presente en la muestra o de referencia compite con el conjugado cAMP marcado con peroxidasa de rábano picante (HRP) por los sitios de unión en los anticuerpos anti-cAMP. En ausencia de cAMP, la mayoría de los conjugados cAMP-HRP se unen a los anticuerpos. Concentraciones crecientes de cAMP disminuyen competitivamente la cantidad de conjugado unido, por lo que disminuye la actividad HRP.
Opciones de pedido del kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP
Kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP
Kit Explorer (96 pocillos) - Ref.: R8088
- Dos (2) placas de 96 pocillos de fondo negro/transparente
- 100 ml de tampón de ensayo de ELISA
- 1 vial de anticuerpo de conejo anti-cAMP
- 1 vial de calibrador de cAMP
- 1 vial de conjugado cAMP-HRP
- 100 ml de concentrado 10X de solución de lavado
- 50 ml de tampón de lisis celular
- 1 vial de sustrato 100X
- 100 ml de tampón de sustrato
N.º R8088
Kit Bulk (96 pocillos) - Ref.: R8089
- Diez (10) placas de 96 pocillos de fondo negro/transparente
- 950 ml de tampón de ensayo de ELISA
- 2 viales de anticuerpo de conejo anti-cAMP
- 2 viales de calibrador de cAMP
- 2 viales de conjugado cAMP-HRP
- 950 ml de concentrado 10X de solución de lavado
- 450 ml de tampón de lisis celular
- 2 viales de 900 µl de sustrato 100X
- 950 ml de tampón de sustrato
N.º R8089
Kit Explorer (384 pocillos) - Ref.: R8044
- Dos (2) placas de 384 pocillos de fondo negro/transparente
- 100 ml de tampón de ensayo de ELISA
- 2 viales de anticuerpo de conejo anti-cAMP
- 2 viales de calibrador de cAMP
- 2 viales de conjugado cAMP-HRP
- 100 ml de concentrado 10X de solución de lavado
- 25 ml de tampón de lisis celular
- 1 vial de sustrato 100X
- 100 ml de tampón de sustrato
N.º R8044
Recursos del kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP
Nota de aplicación
Flujo de trabajo completo para cAMP utilizando el kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP
Complete cAMP workflow solution using the CatchPoint cAMP Fluorescent Assay Kit
Los receptores acoplados a proteína G (GPCR) son importantes proteínas transmembrana que traducen las señales extracelulares en respuestas intracelulares. Estas respuestas celulares se componen...
eBook
Ensayos optimizados para una investigación pionera
Optimized Assays for Breakthrough Research
La investigación en biología se ha simplificado considerablemente gracias a la disponibilidad de kits de ensayo, instrumentos y protocolos de ensayo estandarizados de fabricantes comerciales.
Hoja de datos
Kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP
CatchPoint cAMP Fluorescent Assay Kit
El kit de ensayo CatchPoint® Cyclic-AMP mide los niveles de cAMP y la actividad adenilato ciclasa con un formato de inmunoensayo competitivo. Los reactivos de alta afinidad del ensayo se han optimizado para...
Productos y servicios compatibles del kit de ensayo fluorescente CatchPoint cAMP
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