Descripción general del kit de ensayo FLIPR Potassium
El kit de ensayo FLIPR Potassium aprovecha la permeabilidad de los iones de talio (Tl+) a través de los canales de potasio (K+) tanto activados por voltaje como por ligando. En este ensayo se utiliza un nuevo colorante indicador muy sensible al Tl+ que produce una señal fluorescente brillante tras unirse al Tl+ que pasa a través de los canales de potasio. La intensidad de la señal del Tl+ es proporcional al número de canales de potasio en estado abierto; por tanto, proporciona una indicación funcional de la actividad de los canales de potasio. Además, se emplea uno de nuestros colorantes de enmascaramiento patentados para reducir adicionalmente la fluorescencia de fondo y mejorar la relación señal-ruido.
- Medición funcional de la actividad de los canales de potasio en un ensayo con células
- Protocolo homogéneo sin lavado que reduce la variación entre pocillos y simplifica el flujo de trabajo
- Ventana de señal ampliada en comparación con el ensayo no homogéneo
- Procedimiento rápido con menos tiempo de intervención
Datos del kit de ensayo FLIPR Potassium
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Comparación de kits de potasio
Comparación de los resultados del kit de ensayo FLIPR Potassium con un kit de la competencia.
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Comparación de las ventanas de señal
Comparación del rango dinámico de señal entre el kit de ensayo FLIPR Potassium y un kit de la competencia. El control negativo es terfenadina 4 µM; el control positivo es el tampón. Factor Z' del kit de ensayo FLIPR Potassium = 0,85 y n = 32, en comparación con el factor Z' del kit de la competencia = 0,64 y n = 30.
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Inhibición del canal hERG
Inhibición dependiente de concentración del canal hERG por compuestos de referencia.
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Optimización de la estimulación de canales hERG
Las células se incubaron con colorante y se añadieron los tampones estimulantes durante la detección en el sistema FLIPR Tetra. La respuesta dependiente de concentración de la señal se caracterizó en diferentes condiciones. La señal óptima se obtuvo con la combinación de Tl+ 1 mM y tampón estimulante K+ 10 mM (concentración final) diluido en tampón sin cloruro.
Tecnología del kit de ensayo FLIPR Potassium
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Mecanismo del kit de ensayo
El ensayo aprovecha la permeabilidad del talio (Tl+) a través de los canales de potasio (K+). Las células se incuban con una forma éster de AM de un colorante fluorescente sensible al talio. Las esterasas intracelulares escinden el grupo AM quedando atrapado el colorante dentro de las células. A continuación, las células se estimulan con una mezcla de K+ y Tl+ o bien con un ligando en presencia de Tl+. El aumento de la señal de fluorescencia representa el flujo de entrada de Tl+ en la célula a través del canal de potasio y se convierte en una medida de la actividad funcional de los canales de potasio. La señal de fondo se reduce mediante solución de enmascaramiento.
Recursos del kit de ensayo FLIPR Potassium
eBook
Ensayos optimizados para una investigación pionera
Optimized Assays for Breakthrough Research
La investigación en biología se ha simplificado considerablemente gracias a la disponibilidad de kits de ensayo, instrumentos y protocolos de ensayo estandarizados de fabricantes comerciales.
Póster científico
Evaluación de la potencia in vitro de los inhibidores de hERG: Ensayo con células de fluorescencia sensible al talio frente a electrofisiología automatizada
In Vitro Potency Assessment of hERG Inhibitors: Cell-Based Thallium-Sensitive Fluorescence Assay vs. Automated Electrophysiology
Consulte este póster para ver el rendimiento del ensayo con células de fluorescencia sensible al talio en el sistema FLIPR Tetra comparado con el rendimiento obtenido mediante técnicas de registro electrofisiológicas...
Nota de aplicación
Caracterización de bloqueadores de canales hERG usando el kit de ensayo FLIPR Potassium en el sistema FLIPR Tetra
Characterization of hERG channel blockers using the FLIPR Potassium Assay Kit on the FLIPR Tetra System
La inhibición inducida por fármaco de un canal iónico gen relacionado con ether-à-go-go humano (human ether-à-go-go-related gene, hERG) se ha relacionado con la susceptibilidad de los pacientes a taquiarritmia ventricular potencialmente mortal,...
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Nota de aplicación
Desarrollo de un ensayo de transportador potasio-cloruro con células usando el kit de ensayo FLIPR Potassium
Development of a cell-based potassium-chloride transporter assay using the FLIPR Potassium Assay Kit
El kit de ensayo FLIPR Potassium se puede usar para medir la actividad funcional del cotransportador de catión-cloruro hKCC2 usando un protocolo homogéneo sin lavado. El kit de ensayo proporciona una...
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Póster científico
Nuevo ensayo homogéneo de canal de iones de potasio para cribado de alto rendimiento
A Novel Homogenous Potassium Ion Channel Assay for High-Throughput Screening
Los canales iónicos son una clase de proteínas de membrana que median en el movimiento de iones cargados a través de la membrana celular. Los canales de potasio constituyen el grupo más grande y diverso de...
Publicaciones
La evaluación de parámetros de pulsatilidad en células madre pluripotentes inducidas humanas permite el cribado cuantitativo in vitro de cardiotoxicidad
Assessment of Beating Paramaters in Human Induced Pluripotent Stem Cells Enables Quantitative in Vitro Screening for Cadiotoxicity
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Evaluación multiparamétrica in vitro de los efectos de compuestos sobre la fisiología de cardiomiocitos usando células iPSC
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Desarrollo de un ensayo in vitro de flujo de Tl+ para la identificación de agonistas de canales de potasio
