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Kit de ensayo Neurotransmitter Transporter Uptake

Hasta hace muy poco se utilizaban compuestos marcados radioactivamente para medir la captación de los transportadores de serotonina, norepinefrina y dopamina. Con la introducción del kit de ensayo Neurotransmitter Transporter Uptake, los investigadores ahora tienen una herramienta para detectar la captación cinética en células vivas de estos tres neurotransmisores clave.

  • El ensayo fluorescente y homogéneo en células vivas sustituye a la radioactividad, reduciendo los costes de eliminación del material y eliminando los riesgos para la seguridad asociados a los ensayos con marcaje radioactivo.
  • El formato de ensayo homogéneo de un solo paso es adecuado para la automatización y cribado de alto rendimiento
  • Las dos opciones de configuración del ensayo ofrecen mayor flexibilidad: modo punto final para aplicaciones de alto rendimiento o modo cinético en tiempo real para estudios mecanicistas

Datos del kit de ensayo Neurotransmitter Transporter Uptake

  • Inhibición de nisoxetina en células HEK-hSERT

    Inhibición de nisoxetina en células HEK-hSERT

    Se sembraron células HEK que expresaban de forma estable SERT humano durante toda la noche a una concentración de 10 000 células por pocillo en placas de 384 pocillos recubiertos con D-lisina. Se retiró el medio y las células se incubaron con nisoxetina (Ki publicada = 383 nM) en HBSS/0,1 % de BSA durante 10 minutos a 37 °C antes de la adición del colorante. El ensayo se realizó según el protocolo experimental y se leyó en el lector FlexStation® 3 de Molecular Devices en modo cinético durante 30 minutos.

  • Flexibilidad en la siembra de células

    Se sembraron células HEK que expresaban de forma estable NET humano durante toda la noche (círculos vacíos azules) o el día del ensayo (cuadrados rellenos negros) a una concentración de 20 000 células por pocillo en placas de 384 pocillos recubiertos de D-lisina y se permitió que se adhirieran durante 3 horas. Se retiró el medio y se incubaron las células con nomifensina en HBSS/0,1 % de BSA durante 10 minutos a 37 °C antes de la adición del colorante. El ensayo se leyó en el lector FlexStation® 3 en modo cinético durante 30 minutos. La curva de inhibición se expresa como el área bajo la curva.

    Flexibilidad en la siembra de células

  • Correlación de IC50 para DAT, NET y SERT (resultados del cliente)

    Correlación de IC50 para DAT, NET y SERT (resultados del cliente)

    Se sembraron durante toda la noche células que expresaban de forma estable DAT, NET y SERT humanos a una concentración de 60,000 células/pocillo (placa de 96 pocillos) y se trataron con 8 inhibidores diferentes conocidos. Tras 10 minutos, se añadió la solución del colorante y el ensayo se realizó según el protocolo descrito anteriormente. Se calculó el logaritmo de Ki a partir de los datos resultantes usando la ecuación de Cheng-Prusoff y se determinó la correlación con los valores de Ki conocidos de los tres transportadores. En la gráfica se presentan los coeficientes de correlación R2 de cada transportador, el coeficiente de correlación (valor R2) de los 24 valores fue 0,91.

Tecnología del kit de ensayo Neurotransmitter Transporter Uptake

  • Principio del ensayo-Neurotransmisores

    Principio del ensayo de neurotransmisores

    El kit de ensayo Neurotransmitter Transporter Uptake utiliza un sustrato fluorescente que reproduce los neurotransmisores aminas biógenas y entra en la célula a través de estos transportadores específicos, lo que da lugar a un aumento de la intensidad de fluorescencia intracelular que se monitoriza en tiempo real usando un lector de microplacas con lectura del fondo del pocillo. En este cómodo procedimiento que no requiere lavado, las células se incuban con el reactivo del kit y se transfieren al lector de placas para su evaluación. El ensayo es ideal para su uso en el ámbito académico, biotecnológico y farmacéutico para investigación, desarrollo de ensayos y cribado.

    Flujo de trabajo-Neurotransmisores

    Flujo de trabajo de transportadores de neurotransmisores

    Si desea más información, consulte el prospecto del kit de ensayo Neurotransmitter Transporter Uptake, al que puede acceder a través de la base de datos de Molecular Devices.

Opciones de pedido del kit de ensayo Neurotransmitter Transporter Uptake

Kit de ensayo Neurotransmitter Transporter Uptake

Kit Evaluation - Ref.: R6138

  • 1 vial = 1 placa × 2 viales cada una

N.º R6138

$175.00 USD

1

Kit Explorer - Ref.: R8173

  • 1 vial = 1 placa × 5 viales

N.º R8173

$671.00 USD

1

Kit Bulk - Ref.: R8174

  • 1 vial = 10 placas × 5 viales

N.º R8174

$4,798.00 USD

1

Recursos del kit de ensayo Neurotransmitter Transporter Uptake

Productos y servicios compatibles del kit de ensayo Neurotransmitter Transporter Uptake