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Kit de ensayo de captación de ácidos grasos QBT

Los protocolos convencionales para la monitorización de la captación de ácidos grasos usando radioactividad a menudo requieren de la lisis celular y el procesamiento a muy baja temperatura, lo que les hace caros, lentos e inadecuados para el cribado de alto rendimiento. Otros protocolos basados en fluorescencia generalmente requieren el uso de instrumentos de clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS) de bajo rendimiento, o requieren del lavado de las células, lo que puede comprometer gravemente la integridad de los frágiles adipocitos utilizados en estos ensayos.

El ensayo QBT Fatty Acid Uptake utiliza el análogo de ácido graso fluorescente BODIPY®-ácido dodecanoico acoplado con nuestra tecnología de extinción de señal patentada. El marcaje BODIPY proporciona un análogo de ácido graso de cadena larga ideal que se comporta de forma muy similar a los ácidos grasos naturales y es un conocido sustrato de los transportadores de ácidos grasos.

  • El formato de ensayo homogéneo de un solo paso permite el cribado de alto rendimiento
  • El ensayo fluorescente con tecnología de extinción de señal patentada permite a los usuarios monitorizar la cinética de captación en tiempo real en células vivas
  • Sustituye a los engorrosos y laboriosos protocolos de ensayo con fluorescencia y radioactividad
  • Al prescindir de los compuestos radioactivos se reducen los costes de eliminación del material y se eliminan los riesgos para la seguridad asociados a los ensayos radioactivos

Datos del kit de ensayo QBT Fatty Acid Uptake

  • Fibroblastos frente a adipocitos

    Fibroblastos frente a adipocitos

    Se sembraron adipocitos 3T3 L1 a una concentración de 50 000 células/pocillo en 100 µl de DMEM/FBS en una placa de 96 pocillos y se incubaron a 37 °C durante 5 horas. A continuación, se sustituye el medio de crecimiento por la solución de captación de ácidos grasos. Las lecturas cinéticas se iniciaron inmediatamente con un lector FlexStation® 3 de Molecular Devices. A: adipocitos; B: fibroblastos; C: sin células (solo reactivo de captación).

  • Fibroblastos frente a adipocitos; dosis-respuesta a insulina

    Se sembraron adipocitos 3T3 L1 a una concentración de 50 000 células/pocillo en 100 µl de DMEM/FBS en una placa de 96 pocillos y se incubaron a 37 °C durante 5 horas; a continuación, se cultivaron sin suero durante 1 hora. Se añadieron diferentes concentraciones de insulina a los pocillos y se incubaron durante 30 minutos en un incubador a 37 °C con 5 % de CO2. Al finalizar el tiempo de incubación, se añadieron 100 µl de una mezcla de ácidos grasos a los pocillos y se iniciaron inmediatamente las lecturas cinéticas con un lector FlexStation 3. Las líneas A a F corresponden a adipocitos con 160, 16, 8, 1,6, 0,16 y 0 nM de insulina, respectivamente; las líneas G y H corresponden a fibroblastos con 0 y 160 nM de insulina, respectivamente.

    Fibroblastos frente a adipocitos; dosis-respuesta a insulina

  • Efecto inhibidor de la leptina

    Efecto inhibidor de la leptina

    Se plantaron adipocitos 3T3 L1 a una concentración de 50 000 células/pocillo/100 µl de DMEM/FBS en una placa de 96 pocillos durante 5 horas; a continuación, se cultivaron sin suero durante 1 hora con o sin leptina (100 nM). Se añadió la insulina a 10 nM a los pocillos y se incubaron durante 30 minutos más en un incubador a 37 °C y 5 % de CO2. Al finalizar el tiempo de incubación, se añadieron 100 µl de ácido graso a los pocillos y se iniciaron inmediatamente las lecturas cinéticas con un lector FlexStation 3. Datos cortesía de Cambridge Biotechnology. A: insulina, B: insulina y leptina, C: basal.

Tecnología del kit de ensayo QBT Fatty Acid Uptake

  • Principio del ensayo

    Principio del ensayo QBT Fatty Acid Uptake

    El kit de ensayo QBT Fatty Acid Uptake incluye un tampón de carga que contiene un análogo de ácido graso fluorescente, junto con un colorante de extinción de señal para reducir en gran medida la fluorescencia en el espacio extracelular. Cuando se añade el tampón de carga a las células, el transporte del análogo de ácido graso fluorescente dentro de la célula da lugar a un aumento de la señal de fluorescencia que se monitoriza en tiempo real usando un lector de microplacas de fluorescencia con lectura del fondo del pocillo. La inhibición del transporte de ácidos grasos por los compuestos problema da lugar a una reducción de la señal fluorescente con respecto a los controles.

Opciones de pedido del kit de ensayo QBT Fatty Acid Uptake

Kit de ensayo de captación de ácidos grasos QBT

Kit Evaluation - Ref.: R6132

  • 1 Kit = 1 placa × 2 viales cada una

N.º R6132

$175.00 USD

1

Kit Explorer - Ref.: R8132

  • 1 Kit = 1 placa × 10 viales

N.º R8132

$1,166.00 USD

1

Kit Bulk - Ref.: R8133

  • 1 Kit = 5 placas × 10 viales

 

Compatible con formatos de placa de 96 y 384 pocillos.

N.º R8133

$2,721.00 USD

1

Recursos del kit de ensayo QBT Fatty Acid Uptake

Productos y servicios compatibles del kit de ensayo QBT Fatty Acid Uptake