Lector de microplacas SpectraMax L

Ensayos de viabilidad celular con ATP

Los ensayos luminiscentes con ATP para viabilidad celular y citotoxicidad proporcionan una forma sensible y rápida de medir el número de células viables en cultivo y cuantificar los efectos citotóxicos de tratamientos experimentales. Estos ensayos se pueden realizar en un formato de alto rendimiento empleando los lectores de microplacas SpectraMax®.

Más información sobre el ensayo de viabilidad celular luminiscente CellTiter-Glo y más:

• Ensayos luminiscentes de viabilidad celular y citotoxicidad en el lector de microplacas multimodo SpectraMax i3x
• Mida la viabilidad de células cancerosas usando un ensayo de luminiscencia estable y homogéneo

Salud celular

El concepto de viabilidad celular hace referencia a la cantidad de células sanas en una población y puede evaluarse utilizando ensayos que permitan determinar la actividad enzimática, la integridad de la membrana celular y la producción de ATP, entre otros indicadores. Estos métodos pueden utilizar lecturas de luminiscencia, fluorescencia o colorimetría como indicadores de la viabilidad celular general o incluso de vías celulares específicas. A menudo se utilizan ensayos de citotoxicidad y viabilidad celular para evaluar el efecto de un fármaco u otro tratamiento, y son herramientas valiosas para la búsqueda de nuevos tratamientos, así como para avanzar en nuestro conocimiento de la función de las células normales.

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Señalización celular

La señalización celular permite a las células responder a su entorno y comunicarse con otras células. Las proteínas localizadas en la superficie celular pueden recibir las señales del entorno y transmitir la información al interior de la célula mediante interacciones entre proteínas y reacciones bioquímicas que constituyen una vía de señalización. Los organismos multicelulares dependen de una amplia gama de vías de señalización para coordinar el crecimiento, la regulación y el funcionamiento adecuados de las células y los tejidos. Si se produce una desregulación de la señalización inter o intracelular, las respuestas celulares inadecuadas podrían dar lugar a cáncer y a otras enfermedades.

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ELISA quimioluminiscente

Los factores de crecimiento endotelial vascular (VEGF) constituyen una familia de polipéptidos secretados implicados en el desarrollo vascular en mamíferos y en procesos patológicos que implican el crecimiento anómalo de vasos sanguíneos.

Más información sobre el método de ELISA quimioluminiscente usando nuestro luminómetro y el software de adquisición y análisis de datos:

• ELISA quimioluminiscente de VEGF con el luminómetro de microplacas SpectraMax L

Citotoxicidad

A menudo se mide la citotoxicidad en respuesta a un tratamiento experimental o un posible fármaco. Tener una forma de detectar fácilmente la citotoxicidad en las células tratadas es fundamental para identificar nuevos tratamientos terapéuticos o para entender las vías de señalización celular que afectan a la salud de las células. El nivel de ATP en una población de células y la integridad de las membranas celulares son indicadores frecuentes de citotoxicidad y ambos pueden medirse con una serie de ensayos en microplacas.

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Ensayos de citotoxicidad

A menudo se mide la citotoxicidad en respuesta a un tratamiento experimental o un posible fármaco. Tener una forma de detectar fácilmente la citotoxicidad en las células tratadas es fundamental para identificar nuevos tratamientos terapéuticos o para entender las vías de señalización celular que afectan a la salud de las células. El nivel de ATP en una población de células y la integridad de las membranas celulares son indicadores frecuentes de citotoxicidad y ambos pueden medirse con una serie de ensayos en microplacas.

Más información sobre la citotoxicidad en células:

• Citotoxicidad en células: Fácil determinación utilizando los ensayos biológicos ViaLight Plus y ToxiLight de Lonza en el luminómetro de microplacas SpectraMax L

ELISA

Los ensayos de inmunoadsorción ligados a enzima (ELISA) se utilizan para medir la cantidad de una proteína específica, usando un formato de microplaca, y los resultados se detectan frecuentemente a través de la absorbancia en el rango de longitudes de onda visibles. Los formatos de ELISA quimioluminiscentes y fluorescentes ofrecen sensibilidad mejorada para una cuantificación exacta de analitos menos abundantes.

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Luminiscencia

Más información sobre la detección de luminiscencia: qué es, cómo funciona y las ventajas de la luminiscencia sobre otros modos de detección. Cubriremos los principales ensayos con luminiscencia, como ensayos con gen indicador de luciferasa doble, ELISA quimioluminiscente, citotoxicidad y BRET.

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Microbiología y contaminante

Se estima que los microorganismos, incluidas las bacterias, constituyen aproximadamente el 15 por ciento de la biomasa de la tierra y, en el cuerpo humano, superan a las células humanas en una proporción de 10 a 1. Estos microorganismos representan un gran beneficio para nosotros y también son vitales en muchos campos de investigación, desde la medicina a la producción de energías alternativas. Por otro lado, es necesario el control de los microorganismos y las sustancias tóxicas que producen para garantizar la seguridad de los productos farmacéuticos. Los científicos cuya investigación se basa en células de mamíferos deben controlar cuidadosamente estos cultivos en busca de contaminantes microbianos no deseados para asegurarse de que sus resultados experimentales sean fiables.

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Monitorización de micoplasma

Los micoplasmas, los procariotas más pequeños y simples, son contaminantes frecuentes de los cultivos celulares. Los síntomas de contaminación con micoplasmas incluyen la reducción de la velocidad de proliferación y cambios en las respuestas celulares, como la expresión génica.

Descubra cómo el ensayo MycoAlert y el ensayo MycoAlert PLUS de Lonza proporcionan una forma rápida y cómoda para detectar micoplasmas viables en cultivos celulares utilizando un lector de microplacas de luminiscencia.

• Ensayos de detección de micoplasmas MycoAlert en lectores de microplacas de Molecular Devices

NanoBRET/BRET

La transferencia de energía de resonancia de bioluminiscencia (BRET) es una técnica para medir interacciones proteína-proteína o proteína-ligando que implica la interacción de un donador bioluminiscente y un aceptor fluorescente.

La detección de señales NanoBRET y el análisis de los datos resultantes requieren instrumentación sensible y un software avanzado. Regístrese para obtener más información:

• Mida la interacción de proteínas p53-MDM2 con la tecnología NanoBRET
• Tecnología NanoBRET en el lector de microplacas multimodo SpectraMax i3x

Detección, cuantificación y análisis de proteínas

La detección, cuantificación y análisis de proteínas son cruciales en la investigación de una gran variedad de procesos biológicos. La medición de la concentración de proteína es necesaria en procesos que abarcan desde la purificación y marcaje de proteínas hasta la preparación de muestras para electroforesis. Las proteínas se pueden cuantificar directamente mediante absorbancia a 280 nm, o indirectamente mediante métodos colorimétricos (BCA, Bradford, etc.) o fluorimétricos que ofrecen ventajas como una mayor sensibilidad. Para identificar y medir una proteína específica dentro de una muestra compleja, por ejemplo, suero o lisado celular, puede utilizarse un ELISA.

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Especies reactivas del oxígeno (Reactive Oxygen Species, ROS)

Las especies reactivas del oxígeno (ROS) son moléculas reactivas a nivel químico que contienen oxígeno. En los eucariotas, estas moléculas se generan principalmente durante la respiración aerobia y pueden causar problemas, como daño en el ADN y peroxidación de lípidos, que tienen como consecuencia el daño celular.  

Demostramos cómo se pueden utilizar los lectores de microplacas SpectraMax para la cuantificación exacta de niveles de ROS con un ensayo de luminiscencia:

• Medición de especies reactivas del oxígeno con los lectores de microplacas SpectraMax

Ensayo con gen indicador

Los ensayos con gen indicador permiten a los investigadores determinar si un gen se expresa y en qué grado. Se emplean para estudiar las vías de señalización, la regulación génica, la estructura de elementos reguladores y mucho más. Un vector de gen indicador consiste en un promotor o gen de interés, junto con un gen indicador como la luciferasa de luciérnaga, que codifica una proteína cuya actividad se puede medir fácilmente. El vector se transfecta a células de mamífero y cuando el gen de interés se activa en las células, el gen indicador también se expresa y se puede medir usando reactivos de detección apropiados.

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Ensayos con gen indicador de luciferasa simple/doble

Los ensayos con gen indicador son herramientas importantes para estudiar la expresión génica asociada a la activación de vías celulares. Las células son transfectadas con un plásmido que contiene el gen indicador y una secuencia de interés, normalmente un promotor u otro elemento de control de la transcripción. Cuando se activa el promotor, se expresa el gen indicador y se pueden medir sus niveles.

Más información sobre el ensayo con gen indicador de luciferasa:

• Monitorización de la activación de NF-kB con un ensayo sensible con gen indicador doble en el lector de microplacas SpectraMax iD5*
• Detecte la expresión de luciferasa doble en el lector de microplacas FlexStation 3
• Ensayos de luciferasa doble en formatos de 96 y 384 pocillos en SpectraMax L
• Medición de la expresión de luciferasa mediante el kit del ensayo con gen indicador SpectraMax Glo Steady-Luc