Autofoco
Rutinas de enfoque automático para adquisición y análisis de imágenes de alto contenido
Algoritmos de enfoque automático para diversas aplicaciones, como placas de “órgano en un chip” personalizadas
El sistema ImageXpress Pico utiliza dos sólidos mecanismos de autofoco:
- Detección de superficie: autofoco del hardware
- Búsqueda del mejor plano: autofoco basado en la imagen
El autofoco por hardware utiliza un haz LED para detectar superficies reflectantes y está diseñado para ofrecer velocidad. Funciona bien para muestras adherentes en placas o portaobjetos con cámara. Cuando está activado, el autofoco basado en la imagen busca en un rango el mejor plano de enfoque basado en el contraste de la imagen. Funciona bien para portaobjetos con cubreobjetos o para muestras en una placa que no son planas, como células en suspensión o esferoides. El sistema ImageXpress Pico con el software CellReporterXpress proporciona un enfoque fiable en todo su material de laboratorio para garantizar una adquisición de imágenes de alta calidad de una gran variedad de tipos de muestra.
Algoritmos de detección de superficie
Fondo de placa
El autofoco del hardware detecta la superficie más próxima al objetivo, es decir, el fondo de la placa. Funciona bien con muestras adherentes en placas o portaobjetos con cámara cuando se adquieren imágenes a bajo aumento o si el material de laboratorio tiene un fondo grueso. Esta es la opción de autofoco del hardware más rápida.
Fondo de pocillo
El autofoco del hardware detecta las dos superficies más próximas al objetivo, esto es el fondo de la placa y el fondo del pocillo. La opción “Fondo de pocillo” está diseñada para muestras en medio líquido, como placas de pocillos o portaobjetos con cámara. Esta es la opción de autofoco del hardware utilizada con más frecuencia.
Inserto de pocillo
El autofoco del hardware detecta las tres superficies más próximas al objetivo, esto es el fondo de la placa, el fondo del pocillo y el inserto del pocillo. La opción “Inserto de pocillo” está diseñada para insertos de pocillo en placas de pocillos o para cualquier diseño de material de laboratorio que tenga una tercera superficie diferenciada.
Algoritmos de búsqueda del mejor plano
Si las opciones de detección de superficie no proporcionan un enfoque satisfactorio, seleccione la opción “Buscar mejor plano” para añadir el autofoco basado en la imagen al primer canal dentro del rango de búsqueda seleccionado. La adición del autofoco basado en la imagen es útil para muestras más gruesas, muestras con planos de mejor enfoque variables o material de laboratorio con grosor variable.
Los algoritmos de búsqueda del mejor plano se centran en la superficie detectada por el autofoco del hardware y buscan dentro de un rango específico hasta encontrar el plano focal óptimo.
- Rango de búsqueda normal: busca en un rango del 7,5 % por encima y del 7,5 % por debajo del fondo del material de laboratorio.
- Rango de búsqueda ancho: busca en un rango del 20 % por encima y del 20 % por debajo del fondo del material de laboratorio.
- Rango de búsqueda superancho: a diferencia de estas dos opciones, que buscan en torno a la superficie, el rango de búsqueda superancho busca en un rango de 300 µm por encima de la superficie.
Anclaje de posición de enfoque
Para lograr una velocidad de cribado mayor, hemos introducido la posibilidad de seleccionar la opción “Anclaje de posición de enfoque” para guardar la posición de enfoque actual y desactivar los controles de autofoco. El software utiliza la posición de enfoque guardada para cualquier instantánea posterior de imágenes previas y para la adquisición de imágenes. Esto puede agilizar considerablemente la adquisición de imágenes de placas a bajo aumento o cuando esté trabajando con muestras macroscópicas, como organismos completos o tejidos.
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