Luminiscencia
¿Qué es la luminiscencia?
La luminiscencia es la emisión de luz por parte de una sustancia como resultado de una reacción química (quimioluminiscencia) o enzimática (bioluminiscencia).
Desde el punto de vista óptico, la detección de luminiscencia es más sencilla que la detección de fluorescencia, ya que no precisa de una fuente de luz o una óptica concreta para la excitación.
Figura 1: Reacción de tipo “flash” y “glow”
Según los perfiles cinéticos, la luminiscencia puede ser una reacción de tipo “flash” o “glow”. La luminiscencia flash proporciona una señal muy brillante durante un periodo de tiempo corto, que suele ser de segundos. La luminiscencia glow emite una señal más estable, pero habitualmente menos intensa, que puede durar varios minutos u horas. Por lo general, la luminiscencia flash utiliza un sistema de detección con inyectores capaz de proporcionar sustrato a la reacción poco antes de proceder a la medición, de modo que la señal no se pierda. Para la luminiscencia se suele recomendar el uso de microplacas blancas, ya que reflejan la luz y maximizan la señal (véase la figura 1).
Ventajas de la luminiscencia
La luminiscencia es una plataforma de detección extremadamente popular para muchas aplicaciones en comparación con la absorbancia y la fluorescencia. Ofrece generalmente un rango dinámico más amplio y mayor sensibilidad, ya que la interferencia de fondo (autofluorescencia de compuestos, medios y células) es baja. Además, los ensayos de luminiscencia a menudo usan un protocolo homogéneo (sin lavado), que facilita su automatización para aplicaciones de alto rendimiento.