Adquisición y análisis de imágenes 3D de modelos celulares como esferoides, organoides y biología de “órgano en un chip” para el cribado de tratamientos contra el cáncer
El cáncer implica cambios que permiten a las células crecer y dividirse sin respetar los límites normales, invadir y destruir los tejidos adyacentes y, finalmente, metastatizar a sitios distantes del cuerpo. Los investigadores del cáncer necesitan herramientas que les permitan estudiar más fácilmente las complejas y a menudo poco comprendidas interacciones entre las células cancerosas y su entorno, e identificar puntos de intervención terapéutica.
Descubra nuestros sistemas de adquisición de imágenes de alto contenido y el software de análisis que facilitan la investigación del cáncer utilizando modelos celulares 3D biológicamente relevantes como esferoides, organoides y sistemas de “órgano en un chip” que simulan el entorno in vivo de un tumor u órgano.

Figura 1: Flujo de trabajo para el análisis de esferoides en un entorno de cribado de alto rendimiento. Un único esferoide se puede crecer en una placa de 96 o 384 pocillos, tratarlo con compuestos y teñirlo con una mezcla de colorantes de los que se pueden adquirir imágenes sin necesidad de lavado. Los esferoides también se pueden fijar si se desea. (Derecha) Se tomaron imágenes de luz transmitida de células HCT116 durante un periodo de 63 horas utilizando la adquisición de lapso de tiempo en el sistema ImageXpress Micro Confocal para mostrar la formación de un esferoide (objetivo 10X).
Ventajas de la tecnología de adquisición de imágenes 3D para esferoides de cáncer
Los esferoides de cáncer recrean el comportamiento del tumor de una forma mucho más eficiente que los cultivos celulares 2D estándar. Dichos modelos de esferoides 3D se están utilizando con éxito en entornos de cribado para identificar posibles tratamientos contra el cáncer. Estos sistemas de cultivo se pueden utilizar en análisis multiparamétricos para cuantificar diferentes resultados biológicos, acelerando el desarrollo de fármacos contra el cáncer.
Los beneficios clave son:
- El desarrollo de adquisición de imágenes 3D de alto contenido significa un paso importante para facilitar análisis más relevantes y exactos.
- Los sistemas de cultivo 3D pueden producir rápidamente esferoides uniformes de células cancerosas humanas que pueden emplearse en formato de alto rendimiento para acelerar el desarrollo de fármacos contra el cáncer.
- La investigación con análisis de imágenes 3D confocales de células cancerosas ha permitido la caracterización multiparamétrica de muchos resultados biológicos.
Flujo de trabajo para el análisis de esferoides de cáncer 3D en un entorno de cribado de alto rendimiento
Los esferoides se pueden crecer en placas de 96 o 384 pocillos, tratarlos con compuestos y teñirlos con colorantes que muestren los procesos y vías celulares en funcionamiento. En algunos casos pueden adquirirse imágenes de los esferoides sin necesidad de lavado; también se pueden fijar si se desea.
Simplifique su flujo de trabajo de oncología con una amplia diversidad de sistemas de adquisición de imágenes, cribado celular y lectores de microplacas.
El flujo de trabajo ilustra un proceso simplificado para el análisis de esferoides en el que se destacan los sistemas que pueden ayudarlo a optimizar la investigación e incrementar su rendimiento.
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Cultivo de esferoides - Las células cancerosas se pueden cultivar directamente en una placa de fondo redondo de adherencia ultrabaja (ULA), o en otro material de laboratorio para desarrollar la morfología típica de un esferoide. Otro material de laboratorio permite crecer varios esferoides en un único pocillo.
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Tratamiento con compuestos – Tras la formación del esferoide, se añaden a los pocillos compuestos a las concentraciones deseadas y, a continuación, se incuban durante uno o varios días, dependiendo del mecanismo que se esté estudiando.
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Tinción de marcadores – Una vez finalizado el tratamiento con compuestos, se añaden los colorantes directamente a los medios. Se pueden emplear colorantes que no requieren lavado para evitar perturbar los esferoides, aunque estos se pueden lavar cuidadosamente incluso con automatización, si fuera necesario.
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Adquisición de imágenes de esferoides – Se pueden capturar imágenes individualmente dentro del cuerpo del esferoide o como Z-stack (múltiples imágenes tomadas a diferentes profundidades) utilizando un equipo especializado de adquisición de imágenes.
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Análisis de células cancerosas – Se puede utilizar el software de análisis de imágenes celulares para realizar un análisis cuantitativo de las imágenes de las células para monitorizar la expresión de diferentes marcadores y cuantificar las lecturas biológicas.
Adquisición de imágenes confocales de alto rendimiento de esferoides para el cribado de tratamientos para el cáncer
En los últimos años se ha producido un progreso significativo en el desarrollo de agregados de células tumorales in vitro para su uso como modelos de entornos tisulares in vivo. Cuando estos agregados se siembran en un pocillo de una microplaca de fondo redondo de baja adherencia forman un esferoide definido. Se cree que los esferoides recrean el comportamiento del tumor más eficazmente que los cultivos celulares bidimensionales (2D) normales porque, al igual que los tumores, contienen tanto células expuestas en la superficie como profundamente enterradas, células en proliferación o no, y un centro hipóxico con una capa de células exterior bien oxigenada. Dichos modelos de esferoides 3D se están utilizando con éxito en entornos de cribado para identificar posibles tratamientos contra el cáncer.
Si bien existen algunas dificultades para desarrollar ensayos sólidos con esferoides, el uso de la adquisición automatizada de imágenes de alto rendimiento y alto contenido es un paso importante para facilitar análisis más relevantes de candidatos a fármacos quimioterapéuticos.
- Capture un esferoide completo en un único campo de visión con un aumento de 20X.
- Realice cribados biológicamente relevantes de esferoides 3D en formato de 96 o 384 pocillos.
- Utilice la adquisición de imágenes confocales para detectar con exactitud las respuestas celulares.
- Conserve espacio de almacenamiento guardando únicamente las reconstrucciones 2D de las imágenes del plano Z.
Figura 1. Cribado rápido de esferoides 3D en microplacas
(1a) Montaje de miniaturas de imágenes de esferoides HCT116 en una placa de 96 pocillos tratados con compuestos e imágenes adquiridas con un objetivo Plan Fluor 10X. Los núcleos teñidos con Hoechst (azul) se han superpuesto con el marcador de apoptosis CellEvent Caspase 3/7 (verde).
(1b) Los controles no tratados están en la columna 4 y (1c) en las columnas 5-7 es evidente una respuesta de la caspasa 3/7 en las que se diluyó paclitaxel en serie 1:3 partiendo de 1 µM en la fila A (replicados de 3 en horizontal).
(1d, 1e) Se combinaron 11 planos Z en una imagen de proyección máxima 2D y se analizó con un módulo personalizado simple. Se muestran las imágenes sin procesar que presentan un grado bajo y alto de apoptosis con sus correspondientes máscaras de segmentación (azul = núcleos, rosa = células apoptóticas).
Aplicaciones y ensayos
Molecular Devices, líder del sector en la adquisición de imágenes celulares, ofrece una gran variedad de herramientas para ayudar en la investigación en ciencias de la vida, el descubrimiento de fármacos y el cribado de alto rendimiento. Nuestros sistemas de adquisición de imágenes de alto contenido pueden impulsar el éxito de sus iniciativas en investigación bioanalítica del cáncer. También ofrecemos varias configuraciones de nuestros lectores de microplacas multimodo, así como una línea de escáneres de micromatrices fáciles de usar.
Descubra cómo puede ayudarlo nuestra tecnología en sus investigaciones de tratamientos contra el cáncer.
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Esferoides de células cancerosas 3D
El rápido progreso de la investigación del cáncer en las últimas décadas ha visto surgir los esferoides (agregados 3D de células en cultivo) como una valiosa herramienta de investigación que proporciona más relevancia fisiológica que el tradicional cultivo celular 2D.
Conozca cómo se analizan los esferoides formados utilizando diferentes tipos de células cancerosas y empleando métodos proporcionados en nuestras notas de aplicación.
- Adquiera y analice imágenes de esferoides FUCCI
- Análisis 3D y caracterización morfométrica de los efectos de compuestos en cultivos de esferoides de cáncer
- Adquisición de imágenes confocales de alto rendimiento de esferoides para el cribado de tratamientos para el cáncer
- Ensayo de adquisición de imágenes multiparamétrico para medir la citotoxicidad en un modelo tumoral
- Adquisición de imágenes 3D de esferoides de células cancerosas
- Cribado de alto rendimiento de cultivos celulares 3D con múltiples esferoides sin armazón con alta densidad para estudios de toxicidad en el cáncer
Angiogénesis
La angiogénesis es un factor importante en la formación de vasos sanguíneos y en la progresión del cáncer; in vitro, los ensayos de formación de tubos representan un método establecido para evaluar la angiogénesis. Los métodos desarrollados recientemente como los modelos de “órgano en un chip” o in vivo utilizando el pez cebra como sistema modelo proporcionan información diferente en el estudio de la angiogénesis. Es importante destacar que el aumento de escala de estos ensayos para cribados supone un reto importante para la adquisición y análisis de imágenes.
Descubra cómo nuestro sistema de adquisición de imágenes de alto contenido ImageXpress y el software MetaXpress proporcionan un flujo de trabajo simplificado para la evaluación de la angiogénesis usando modelos como el pez cebra, ensayos de formación de tubos y “órgano en un chip”.
- Análisis de imágenes 3D y caracterización de la angiogénesis en el modelo de “órgano en un chip”
- Ensayo de alto contenido de formación de tubos mediante un modelo de angiogénesis in vitro
- Ensayos de adquisición de imágenes de alto rendimiento usando el pez cebra, un organismo modelo para enfermedades humanas
- Vídeo: Investigación de la angiogénesis para tratamientos contra el cáncer
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Autofagia, daño en el ADN
El descubrimiento y evaluación de los tratamientos antineoplásicos incluyen el desarrollo de modelos con células, el cribado de nuevos fármacos y el conocimiento de los mecanismos de acción pertinentes. Los efectos celulares de procesos como el daño en el ADN y la autofagia, un proceso regulado de degradación y reciclaje de proteínas y orgánulos dañados en respuesta al estrés celular, se pueden analizar de forma eficaz mediante la adquisición automática de imágenes celulares.
Descubra cómo la adquisición automática de imágenes celulares proporciona un método eficaz para analizar los efectos celulares de los compuestos antineoplásicos.
Migración celular
La migración celular se define en términos generales como el movimiento de las células de una ubicación a otra. Es un proceso esencial necesario para muchos procesos biológicos, como el desarrollo embrionario, la curación de heridas y las respuestas inmunológicas. La invasión de los tejidos circundantes por las células tumorales, así como la metástasis, son áreas del cáncer que se pueden estudiar utilizando métodos de migración celular in vitro.
Descubra cómo medir la migración celular a lo largo del tiempo y realizar análisis en tiempo real.
- Mida la migración celular mediante la adquisición discontinua de imágenes de lapso de tiempo de células vivas
- Mida la migración celular mediante un simple ensayo de cicatrización de herida con adquisición de imágenes de células vivas con lapso de tiempo
- Análisis de la migración celular con el ensayo Oris Pro
- Evalúe la migración celular con insertos FluoroBlok
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Modelos de enfermedades
La creación de modelos de enfermedad es un proceso que consiste en usar células madre para obtener modelos 3D de células o tejido que exhiben los procesos patológicos que tienen lugar en la enfermedad real. La creación de modelos de enfermedad es crucial para entender cómo progresan las enfermedades y desarrollar tratamientos más eficaces sin necesidad de tejidos de donantes.
Descubra los ensayos con células y los ensayos automatizados con organoides para modelos de enfermedad, la adquisición de imágenes 3D y el papel de los modelos de enfermedad en estudios de inmunooncología y enfermedades neurodegenerativas.
- Seminario web: Establecimiento y adquisición de imágenes de modelos 3D de oncología
- Seminario web: Creación de modelos de enfermedad en el siglo XXI: Ensayos automatizados con organoides con adquisición de imágenes 3D
- Publicación: Creación de modelos de enfermedad con ensayos 3D con células usando un nuevo sistema de chip de flujo y adquisición de imágenes de alto contenido
- Seminario web: Captación de la complejidad de la biología 3D: Organoides para la creación de modelos de enfermedad y la investigación de la toxicidad
- Póster: Nuevos métodos de ensayo para organoides derivados de pacientes con cáncer
- Avance de los clientes: En Bioneer utilizan el sistema ImageXpress Micro Confocal para la adquisición de imágenes de alto rendimiento de modelos 3D de enfermedades
- Seminario web: Sistemas de alto rendimiento de “órgano en un chip” derivados de organoides para el descubrimiento de fármacos y la creación de modelos de enfermedad
Adquisición de imágenes de células vivas
La adquisición de imágenes de células vivas es el estudio de la estructura y función celulares en células vivas mediante microscopía. Permite la visualización y la cuantificación de procesos celulares dinámicos en tiempo real.
La adquisición de imágenes de células vivas abarca una amplia variedad de aplicaciones biológicas, desde ensayos cinéticos a largo plazo a células vivas marcadas con fluorescencia.
Conozca cómo se analizan los procesos celulares empleando métodos proporcionados en nuestras notas de aplicación
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Métodos con luminiscencia
En los estudios del cáncer a menudo se emplean métodos con luminiscencia para medir parámetros como la viabilidad celular en respuesta al tratamiento farmacológico, e interacciones biomoleculares que tienen lugar en respuesta a la estimulación de las vías de señalización celular.
Aquí describimos cómo el lector de microplacas multimodo SpectraMax® iD5 proporciona resultados óptimos para ensayos de luminiscencia. Descubra cómo puede:
Tecnología de organoides/Órgano en un chip
La tecnología de organoides, como la tecnología de “órgano en un chip”, emula la fisiología del órgano a través del cocultivo de células en una matriz 3D de soporte y el uso de canales microfluídicos para perfundir nutrientes o compuestos sobre las estructuras celulares resultantes. Ha ganado popularidad rápidamente como modelo de cribado relevante a nivel biológico para nuevos fármacos y toxicidad.
- Análisis de imágenes 3D y caracterización de la angiogénesis en el modelo de “órgano en un chip”
- Vídeo: Modelos tisulares relevantes a nivel fisiológico utilizando una plataforma de “órgano en un chip” de alto rendimiento
- Ensayo de alto contenido para la caracterización morfológica de redes neuronales 3D en una plataforma microfluídica
- Seminario web: Desarrollo de modelos tisulares de “órgano en un chip” de alto rendimiento para el descubrimiento de fármacos mediante adquisición de imágenes de alto contenido
- Póster: Objetivos de inmersión en agua para la adquisición automática de imágenes de alto contenido para mejorar la precisión y calidad de ensayos biológicos complejos
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Organoides
Los organoides son microtejidos multicelulares tridimensionales (3D) que se han diseñado para recrear fielmente la compleja estructura y funcionalidad de órganos humanos. Los organoides normalmente consisten en un cocultivo de células que muestran un elevado orden de autoensamblaje que permite una representación incluso mejor de respuestas e interacciones celulares in vivo complejas, en comparación con los cultivos celulares 2D tradicionales.
Tumoroides
Un tumoroide es un tipo especial de organoide derivado de células tumorales primarias obtenidas de pacientes con cáncer. Puesto que los tumoroides pueden recrear perfectamente un microambiente tumoral típico, nos brindan información sobre el impacto de dicho microambiente en la progresión del tumor. Es por eso que los tumoroides cuentan con un enorme potencial para el descubrimiento de fármacos contra el cáncer precisos y rentables.
Descubra cómo puede ayudarlo nuestro sistema de adquisición de imágenes de alto contenido ImageXpress a visualizar tumoroides durante el cribado de fármacos:
- Seminario web: Establecimiento y adquisición de imágenes de modelos 3D de oncología
- Seminario web: Creación de modelos de enfermedad en el siglo XXI: Ensayos automatizados con organoides con adquisición de imágenes 3D
- Publicación: Creación de modelos de enfermedad con ensayos 3D con células usando un nuevo sistema de chip de flujo y adquisición de imágenes de alto contenido
- Seminario web: Captación de la complejidad de la biología 3D: Organoides para la creación de modelos de enfermedad y la investigación de la toxicidad
- Póster: Nuevos métodos de ensayo para organoides derivados de pacientes con cáncer
Recursos más recientes
Recursos para ayudarlo en su investigación del cáncer
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Mida la interacción de proteínas p53-MDM2 con la tecnología NanoBRET
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Describimos la validación del lector SpectraMax® iD5 con el par de control de IPP NanoBRET™, formado por la pareja de proteínas que interaccionan p53 y MDM2.
Nota de aplicación
Mida la migración celular mediante la adquisición discontinua de imágenes de lapso de tiempo de células vivas
Measure cell migration using discontinuous time-lapse imaging of live cells
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Detección de autofagia mediante la adquisición automática de imágenes
Detection of autophagy using automated imaging
Detecte y cuantifique efectos de compuestos sobre el proceso de autofagia en el sistema ImageXpress Pico. Para el desarrollo del ensayo se utilizó la línea celular de neuroblastoma humano PC12 como modelo.
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Caracterización fenotípica de los efectos de fármacos antineoplásicos utilizando la adquisición automática de imágenes
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Adquiera y analice imágenes 3D profesionales
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Adquiera y analice imágenes de esferoides FUCCI en el citómetro SpectraMax MiniMax
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Análisis 3D y caracterización morfométrica de los efectos de compuestos en cultivos de esferoides de cáncer
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Nota de aplicación
Adquisición de imágenes confocales de alto rendimiento de esferoides para el cribado de tratamientos para el cáncer
High-Throughput Confocal Imaging of Spheroids for Screening Cancer Therapeutics
En los últimos años se ha producido un progreso significativo en el desarrollo de agregados de células tumorales in vitro para su uso como modelos de entornos tisulares in vivo. Cuando se siembran en un pocillo de...
Nota de aplicación
Adquisición de imágenes 3D de esferoides de células cancerosas
3D Imaging of Cancer Cell Spheroids
Muchas líneas celulares de cáncer formarán esferoides si se cultivan en una matriz tridimensional (3D) favorable. Se cree que estos esferoides representan más fielmente la fisiología del tumor que las células...
Nota de aplicación
Análisis de la migración celular con el ensayo Oris Pro en el citómetro MiniMax de SpectraMax
Cell migration analysis with Oris Pro assay on the SpectraMax MiniMax cytometer
La migración celular, el movimiento de las células desde una ubicación a otra, es un componente crítico tanto de procesos biológicos normales como anómalos. La importancia de la migración celular en diferentes...
Nota de aplicación
Ensayos de adquisición de imágenes de alto rendimiento usando el pez cebra, un organismo modelo para enfermedades humanas
High-throughput imaging assays using zebrafish, a model organism for human disease
Recientemente, el cribado en pez cebra ha ganado popularidad como alternativa al cribado en mamíferos debido a su coste, rendimiento y menores preocupaciones éticas. El pez cebra constituye un modelo útil para el...
Publicaciones
Caracterización fenotípica de los efectos de compuestos tóxicos sobre esferoides de hígado derivados de iPSC mediante adquisición de imágenes confocales y análisis de imágenes tridimensionales
Phenotypic Characterization of Toxic Compound Effects on Liver Spheroids Derived from iPSC Using Confocal Imaging and Three-Dimensional Image Analysis
Los modelos celulares son cada vez más complejos para recrear mejor el entorno in vivo y proporcionar una mayor predictividad de la eficacia y toxicidad de los compuestos. Existe un creciente interés en explorar...
Publicaciones
Ensayos de alto contenido para la caracterización de la viabilidad y morfología de cultivos de esferoides de cáncer 3D
High-Content Assays for Characterizing the Viability and Morphology of 3D Cancer Spheroid Cultures
Existe un interés creciente en el uso de esferoides tridimensionales (3D) para la realización de modelos de cáncer y biología tisular para acelerar la investigación translacional. El desarrollo de ensayos de mayor rendimiento…
Publicaciones
Resumen 5099: Análisis automático rápido y preciso del ciclo celular
Abstract 5099: Automated rapid and accurate cell cycle analysis
Es fundamental disponer de información detallada sobre los compuestos identificados en las campañas de cribado durante el descubrimiento de fármacos y conocer su influencia sobre la progresión del ciclo celular o la reparación del ADN. Los...
Publicaciones
Ensayos de alto contenido para hepatotoxicidad con células derivadas de células madre pluripotentes inducidas
High-Content Assays for Hepatotoxicity Using Induced Pluripotent Stem Cell–Derived Cells
Resumen El desarrollo de ensayos in vitro predictivos para la evaluación preliminar de la toxicidad es extremadamente importante para mejorar el proceso de desarrollo de fármacos y reducir las tasas de desestimación de fármacos durante...
Vídeos y seminarios web

Recorrido por el Centro de Innovación de Organoides

Investigación de la angiogénesis: Los sistemas de adquisición de imágenes de alto contenido ayudan a aprovechar el potencial completo de los modelos tisulares 3D

Adquisición de imágenes 3D de esferoides de cáncer

Oliver Kepp y Jayne Hesley. Rasgos distintivos del cáncer: detección y cuantificación de firmas de muerte celular con adquisición de imágenes de alto contenido

ImageXpress Micro XLS

Adquisición de imágenes 3D de alto rendimiento de esferoides de cáncer

Hepatotoxicidad utilizando células hepáticas derivadas de iPSC y patrón de latido de esferoides cardíacos derivados de iPSC

Eficacia de los fármacos antineoplásicos en esferoides HCT116

Herramientas para aumentar la relevancia biológica de los ensayos 3D