Flujo de trabajo para el desarrollo de líneas celulares
Flujo de trabajo para generar proteínas recombinantes a partir de líneas celulares como CHO, hibridoma o HEK 293.
Desarrollo de líneas celulares para proteínas recombinantes
Para generar un alto rendimiento de productos de proteínas recombinantes, las líneas celulares como CHO, hibridoma o HEK 293 son plataformas típicas de elección. El proceso de desarrollo de líneas celulares estables comienza con la transfección de las células huésped (CHO o HEK 293) con plásmidos recombinantes o con la fusión de células para generar hibridomas. Tras la transfección o fusión de células, se criban y seleccionan grandes cantidades de clones en función de la expresión de la proteína de interés (productos biológicos terapéuticos). Una vez identificados los clones candidatos, cada "acierto" se confirma, se valida y se caracteriza mediante secuenciación de ADN y una serie de ensayos analíticos posteriores. Tras finalizar, los clones principales se expanden y aumentan de escala donde se producen los bioprocesos.
Etapas de un proceso típico de desarrollo de una línea celular
Flujo de trabajo para la generación de proteínas recombinantes
- Transfección - Las células huésped se transfectan con plásmidos recombinantes que codifican una proteína de interés.
- Selección del grupo de células transfectadas -Se seleccionan las células que son estables y producen la proteína de interés.
- Cribado y selección de clones - Se realiza el cribado y se seleccionan los clones con alta expresión de la proteína de interés.
- Caracterización de la línea celular - Se valida y caracteriza la estabilidad y productividad de cada clon.
- Expansión y evaluación posterior - Se expanden los clones y se realizan los bioprocesos posteriores. También se envían al banco de células.