Flujo de trabajo para el desarrollo de líneas celulares

Flujo de trabajo para generar proteínas recombinantes a partir de líneas celulares como CHO, hibridoma o HEK 293.

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Desarrollo de líneas celulares para proteínas recombinantes

Para generar un alto rendimiento de productos de proteínas recombinantes, las líneas celulares como CHO, hibridoma o HEK 293 son plataformas típicas de elección. El proceso de desarrollo de líneas celulares estables comienza con la transfección de las células huésped (CHO o HEK 293) con plásmidos recombinantes o con la fusión de células para generar hibridomas. Tras la transfección o fusión de células, se criban y seleccionan grandes cantidades de clones en función de la expresión de la proteína de interés (productos biológicos terapéuticos). Una vez identificados los clones candidatos, cada "acierto" se confirma, se valida y se caracteriza mediante secuenciación de ADN y una serie de ensayos analíticos posteriores. Tras finalizar, los clones principales se expanden y aumentan de escala donde se producen los bioprocesos.

Pasos de un proceso típico de desarrollo de una línea celular
Etapas de un proceso típico de desarrollo de una línea celular

Flujo de trabajo para la generación de proteínas recombinantes

  1. Transfección - Las células huésped se transfectan con plásmidos recombinantes que codifican una proteína de interés.
  2. Selección del grupo de células transfectadas -Se seleccionan las células que son estables y producen la proteína de interés.
  3. Cribado y selección de clones - Se realiza el cribado y se seleccionan los clones con alta expresión de la proteína de interés.
  4. Caracterización de la línea celular - Se valida y caracteriza la estabilidad y productividad de cada clon.
  5. Expansión y evaluación posterior - Se expanden los clones y se realizan los bioprocesos posteriores. También se envían al banco de células.

Recursos del flujo de trabajo para el desarrollo de líneas celulares