En Newcells Biotech utilizan ImageXpress Pico para desarrollar nuevos modelos celulares

El reto

Newcells Biotech es una empresa experta en la construcción y aplicación de modelos complejos de tejidos humanos para el descubrimiento de fármacos que proporcionan herramientas in vitro validadas para entender cómo interaccionan los fármacos con los tejidos. Su objetivo es facilitar la generación de datos sólidos e informativos para respaldar decisiones críticas durante cualquier etapa del desarrollo de fármacos o del análisis de toxicidades.

Actualmente ofrecen tres plataformas clave a sus clientes (riñón, pulmón y retina) para analizar una gran variedad de compuestos que incluyen moléculas pequeñas, conjugados fármaco-anticuerpo, oligonucleótidos, etc. Algunos de estos modelos se cultivan en Transwells y otros en insertos semipermeables.

Para respaldar el desarrollo de sus modelos, y para fines de control de calidad, era necesario que el equipo de Newcells mejorara la adquisición de imágenes de los modelos que generan. La dificultad con la que se enfrentaron al buscar una solución fue encontrar una solución que pudiera alcanzar la profundidad necesaria para obtener imágenes de los Transwells y, si bien un generador de imágenes confocales manual permitiría obtener las imágenes requeridas, el tiempo de adquisición necesario habría sido prohibitivamente largo para el equipo. La capacidad de realizar rápidamente la adquisición de imágenes de células vivas en el laboratorio era otra consideración crítica, ya que el laboratorio estaba algo alejado de las instalaciones centrales de imagenología.

La solución

El sistema de adquisición automática de imágenes celulares ImageXpress® Pico permitió a Newcells Biotech ampliar considerablemente su capacidad de adquisición de imágenes de modelos celulares complejos; en la actualidad realizan como promedio aproximadamente 18 placas a la semana de diferentes técnicas, desde placas fijadas e inmunoteñidas hasta adquisición de imágenes de células vivas. Lo que el equipo encontró especialmente útil fue la configuración predefinida para insertos semipermeables. Con esta configuración óptima, pudieron acelerar el rendimiento, asegurándose a la vez la calidad de los datos.

Sistema de adquisición automática de imágenes celulares ImageXpress Pico

Detalles

Productos utilizados

El sistema de adquisición automática de imágenes celulares ImageXpress® Pico es más que un microscopio digital; combina la adquisición de imágenes de alta resolución con un potente análisis. Ya sea realizando ensayos en campo claro o adquiriendo imágenes de fluorescencia, el generador de imágenes automático presenta una gama completa de protocolos preconfigurados para ensayos con células para acortar la curva de aprendizaje, de modo que pueda comenzar a realizar experimentos rápidamente.

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Los resultados

Ahora utilizan el sistema ImageXpress Pico como rutina en toda una variedad de ensayos y aplicaciones, especialmente para su plataforma de riñón:

• Captación (mediada por megalina/cubilina) y aclaramiento de moléculas grandes en su modelo de células tubulares proximales primarias (aProximateTM). Esto implica un ensayo de adquisición de imágenes de células vivas con compuestos marcados con fluorescencia, incluido albúmina-FITC con control interno.
• Ensayos de toxicidad, como estrés del retículo endoplásmico (RE) y apoptosis.
• Ensayos de toxicidad mitocondrial en el modelo aProximateTM que incluye la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) y el potencial transmembrana mitocondrial.
• Generación de modelos de enfermedad, como la nefropatía diabética, la inflamación (utilizando su modelos de glomérulos renales) y la fibrosis.

Además, el sistema ImageXpress Pico es ideal para su plataforma de pulmón:

• Ensayo de transición fibroblasto-mesénquima (TFM) pulmonar en su modelo de fibroblastos pulmonares humanos que incluye el depósito de matriz extracelular (colágeno), ensayo de proliferación (incorporación de EdU) y detección de α-SMA (factor de fibroblastos activados).

Fibroblastos pulmonares humanos estimulados con TGF-β1 durante 72 horas e inmunoteñidos para detectar colágeno I extracelular como medida de producción de matriz.

Fibroblastos pulmonares humanos estimulados con TGF-β1 durante 72 horas e inmunoteñidos para detectar colágeno I total (rosa) y actina alfa de músculo esquelético (α-SMA) (verde) como medida de la producción de matriz y de activación de fibroblastos, respectivamente.