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Kit Fura-2 QBT Calcium

El kit Fura-2 QBT Calcium elimina la causa de la variabilidad de los datos y reduce el número de pasos en comparación con los protocolos de lavado convencionales usando Fura-2. Aprovechando nuestra tecnología de enmascaramiento patentada con el indicador de calcio ratiométrico Fura-2 estándar en la industria, los investigadores pueden:

  • Ver la ventana de señal de Fura-2 más grande disponible
  • Eliminar los artefactos debidos al lavado e incrementar el rendimiento con ensayos homogéneos
  • Minimizar el impacto de la carga y fuga irregulares de colorante sobre los resultados
  • Analizar células de baja densidad, poco adherentes o no adherentes usando un protocolo sin lavado
  • Realizar ensayos en los sistemas FlexStation® 3 y FlexStation® Tetra
  • Referenciar miles de publicaciones en las que se ha usado Fura-2 en líneas celulares y dianas

Datos del kit Fura-2 QBT Calcium

  • AGONISMO en células CHO M1 con Fura2

    Agonismo del receptor muscarínico M1 en células CHO M1

    En el lector de microplacas multimodo FlexStation® 3, se usó carbacol para estimular el receptor muscarínico M1 en células CHO M1 para generar curvas de concentración-respuesta, comparando el colorante Fura-2 QBT con el kit BD y el protocolo de lavados tradicional de Fura-2. Los valores de EC50 fueron similares en todos los métodos y estaban dentro del intervalo de valores publicados.

  • Antagonismo del receptor muscarínico M1 en células CHO M1

    En el lector de microplacas multimodo FlexStation 3, se usó carbacol 50 nM como provocación agonista frente a una curva de concentración-respuesta antagonista de atropina. Este kit Fura-2 QBT Calcium proporciona la ventana de señal más grande y los factores Z más sólidos a valores de EC80.

    ANTAGONISMO en células CHO M1 con Fura2

  • AGONISMO en células H1 con Fura2

    Agonismo del receptor H1 endógeno en células HeLa

    Se usó histamina para estimular el receptor de histamina en células HeLa. El ensayo se midió usando el sistema de cribado celular de alto rendimiento FLIPR Tetra® con LED UV. Se generaron curvas de concentración-respuesta comparando el colorante Fura-2 QBT con el kit de calcio ratiométrico BD y el protocolo de lavado tradicional de Fura-2. Con el kit Fura-2 QBT Calcium, los valores de EC50 estaban dentro de un semilogaritmo, mientras que el factor Z a un valor de EC80 era el mayor.

  • Antagonismo del receptor H1 endógeno en células HeLa

    El ensayo se midió usando el sistema de cribado celular de alto rendimiento FLIPR Tetra con LED UV y se utilizó una configuración del experimento y ajustes del sistema similares en la figura 3. Se empleó histamina 40 nM como provocación agonista frente a una curva de concentración-respuesta antagonista de pirilamina.

    ANTAGONISMO en células H1 con Fura2

Tecnología del kit Fura-2 QBT Calcium

  • Mecanismo del kit de ensayo

    Mecanismo del kit de ensayo Fura-2 QBT Calcium

    El kit Fura-2 QBT Calcium utiliza Fura-2-AM, un colorante sensible al calcio que se absorbe en el citoplasma de las células durante la incubación, donde se escinden los grupos bloqueantes lipófilos, lo que da lugar a un colorante fluorescente con carga negativa que permanece dentro de la célula. Tras la activación de la diana, se libera el calcio intracelular unido al colorante, por lo que aumenta la intensidad de fluorescencia. Este kit utiliza una tecnología de enmascaramiento extracelular para bloquear la fluorescencia de fondo y aumentar la ventana de señal de su ensayo y reducir el número de pasos del ensayo.

    Cambio de la señal del flujo de calcio

    Cambio de la señal del flujo de calcio

    El Fura-2 unido a calcio se excita a 340/510 nm y la forma no unida se excita a 380/510 nm. Tras el flujo de calcio, la concentración de calcio en el citoplasma aumenta, lo que provoca que la intensidad de fluorescencia a 340/510 nm aumente de forma proporcional. Por el contrario, la intensidad a 380/510 nm disminuye en sincronización con la disminución de la concentración de colorante no unido. Mediante el cálculo del cociente entre las intensidades de fluorescencia producidas por la excitación a las dos longitudes de onda, se minimizan los artefactos asociados con la distribución irregular del colorante y la variación en el número de células, ya que afectan por igual a ambas mediciones.

  • Cambio espectral del colorante Fura-2 QBT Calcium cuando se une a Ca2+

    Colorante Fura-2 QBT Calcium cuando se une a Ca2+

    El colorante Fura-2 QBT™ Calcium se excita a 340 nm y 380 nm, con emisión a 510 nm. Tras el flujo de calcio, se pueden medir los cambios en la concentración de calcio intracelular.

Opciones de pedido del kit Fura-2 QBT Calcium

Kit Fura-2 QBT Calcium

Kit Evaluation - Ref.: R6139

  • 1 placa × 2 viales cada una

N.º R6139

$164.00 USD

1

Kit Explorer - Ref.: R8197

  • 1 placa × 10 viales + tampón Componente B

N.º R8197

$549.00 USD

1

Kit Bulk - Ref.: R8198

  • 10 placas × 10 viales

 

Compatible con formatos de placa de 96 y 384 pocillos.

N.º R8198

$3,666.00 USD

1

Recursos del kit Fura-2 QBT Calcium