Absorbancia
¿Qué es la absorbancia?
La absorbancia (A), también conocida como densidad óptica (DO), es la cantidad de luz absorbida por una solución. La transmitancia es la cantidad de luz que pasa a través de una solución. La absorbancia y el porcentaje de transmitancia se utilizan frecuentemente en espectrofotometría y se pueden expresar como sigue:
Ecuación de absorbancia
A = Log10(I0/I)
donde I0 es la intensidad de la luz incidente e I es la intensidad de la luz después de pasar a través de la muestra
T = I/I0 y %T = 100 (T)
La ecuación que permite calcular la absorbancia a partir del porcentaje de transmitancia es
A = 2 - log10 (%T)
Determinación de la concentración usando la ley de Beer-Lambert
La concentración de una muestra se puede calcular a partir de su absorbancia mediante la ley de Beer-Lambert, que se expresa como sigue:
A = ε * c * p
Donde ε es la absortividad molar, o coeficiente de extinción molar, en litros mol-1cm-1
c es la concentración del soluto en disolución, en mol/l
p es la longitud de trayectoria de la muestra, en cm, por ejemplo 1 cm para una cubeta
Las mediciones de ultravioleta (UV) en microplacas se hicieron posibles cuando Molecular Devices introdujo el primer lector de microplacas con función UV. Desde entonces, las mediciones de ADN, ARN y proteínas en microplacas que esto permite se han hecho muy populares. Más información sobre cómo se mide la absorbancia y algunas aplicaciones clave que utilizan esta medida.
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Explorando las aplicaciones de ensayos basados en la absorbancia: Desde la investigación de virus a la de cannabis
La lectura de la absorbancia con los lectores de microplacas SpectraMax® y el software SoftMax® Pro permite medir la densidad óptica de las muestras en formato de microplaca o cubeta. Las potentes herramientas de análisis del software generan una curva patrón y datos calculados. Para los laboratorios regulados según la BPF/BPL, los sistemas se suministran equipados con nuestro software de cumplimiento SoftMax Pro GxP.
Aspectos clave:
- ¿Cómo funciona la detección de absorbancia?
- Detección de inmunoglobulinas (Ig) con ELISA: Más formas de investigar enfermedades infecciosas y respuestas inmunitarias
- Análisis optimizado de cerveza y vino mediante la medición de la absorbancia
- Determinación de la aflatoxina total en el cannabis usando un ELISA
