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Absorbancia

¿Qué es la absorbancia?

La absorbancia (A), también conocida como densidad óptica (DO), es la cantidad de luz absorbida por una solución. La transmitancia es la cantidad de luz que pasa a través de una solución. La absorbancia y el porcentaje de transmitancia se utilizan frecuentemente en espectrofotometría y se pueden expresar como sigue:

Ecuación de absorbancia

A = Log10 (I0/I)

donde I0 es la intensidad de la luz incidente e I es la intensidad de la luz después de pasar a través de la muestra

T = I/I0    y    %T = 100 (T)

La ecuación que permite calcular la absorbancia a partir del porcentaje de transmitancia es

A = 2 - log10 (%T)
 

 

Determinación de la concentración usando la ley de Beer-Lambert

La concentración de una muestra se puede calcular a partir de su absorbancia mediante la ley de Beer-Lambert, que se expresa como sigue:

A = ε * c * p

Donde ε es la absortividad molar, o coeficiente de extinción molar, en L mol-1 cm-1
c es la concentración del soluto en disolución, en mol/L
p es la longitud de trayectoria de la muestra, en cm, por ejemplo 1 cm para una cubeta

 

Absorbancia-ilustración

Las mediciones de ultravioleta (UV) en microplacas se hicieron posibles cuando Molecular Devices introdujo el primer lector de microplacas con función UV. Desde entonces, las mediciones de ADN, ARN y proteínas en microplacas que esto permite se han hecho muy populares. Más información sobre cómo se mide la absorbancia y algunas aplicaciones clave que utilizan esta medida.

 

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