Los algoritmos de deconvolución de imágenes revierten el desenfoque fluorescente fuera de foco en microscopía de campo amplio
La microscopía de campo amplio es una potente herramienta que se ha utilizado para investigar los procesos celulares y moleculares implicados en la señalización celular. Aunque el desenfoque fluorescente de la luz fuera de foco es un resultado innato de todos los microscopios de campo amplio, los algoritmos de deconvolución de imágenes pueden revertir este artefacto de la luz fuera de foco.
La opción confocal digital es una tecnología de deconvolución 2D en tiempo real que ayuda a restablecer la resolución y el contraste de una imagen celular mediante la operación matemática de eliminación del desenfoque de la imagen a través de la inversión de la función de la dispersión de puntos. Como consecuencia, las imágenes y los detalles finos se hacen más nítidos, manteniendo a la vez la información cuantitativa.
Aumento significativo del rendimiento manteniendo la calidad del ensayo
La opción confocal digital* mejora el contraste de las imágenes durante la adquisición, lo que le permite reducir a más de la mitad el tiempo de exposición y aumentar el rendimiento, manteniendo la calidad del ensayo. Alternativamente, los ensayos con factores Z' bajos pueden mejorar más del 25 %. Este análisis inteligente permite a los investigadores aumentar su rendimiento, así como la adquisición y análisis de más de 10 millones de células por hora.
La velocidad y comodidad que ofrece el nuevo módulo supone una ventaja real para los científicos, ya que proporciona al usuario la función de deconvolución en tiempo real sin necesidad del procesamiento posterior de las imágenes. Para los investigadores que trabajan en el cribado de alto contenido, se dedican recursos importantes para el cribado de millones de muestras en busca de raros candidatos a nuevos fármacos o a terapia génica.
La opción confocal digital se ha diseñado para los sistemas ImageXpress Pico e ImageXpress Micro.
Diseñado para el sistema ImageXpress Pico y el software de adquisición y análisis de imágenes CellReporterXpress
Aumente significativamente la resolución y la calidad del ensayo con la deconvolución digital confocal 2D en tiempo real. La opción confocal digital* le permiten reducir el tiempo de exposición, manteniendo la significación estadística de sus observaciones. La opción confocal digital se integra a la perfección en el flujo de trabajo de adquisición de imágenes fluorescentes del sistema ImageXpress Pico permitiéndole capturar imágenes con datos de relación señal-ruido más alta para una segmentación y análisis más precisos.
*La opción confocal digital de ImageXpress Pico utiliza la deconvolución 2D en tiempo real AutoQuant.
Sin confocal digital
Con confocal digital
Diseñado para los sistemas ImageXpress Pico y el software de adquisición y análisis de imágenes de alto contenido MetaXpress
El nuevo módulo de deconvolución de imágenes supone una ventaja real para los científicos que trabajan en el cribado de alto contenido, donde se dedican recursos importantes para el cribado de millones de muestras en busca de raros candidatos a nuevos fármacos o a terapia génica. La integración de los sistemas ImageXpress Micro con la opción confocal digital para el software MetaXpress proporciona un rendimiento incomparable fácil de usar, proporcionando a la vez alta velocidad e imágenes de calidad.
La opción confocal digital permite un análisis sólido de las imágenes
Las imágenes con la Opción Confocal Digital activada durante la adquisición (imagen inferior) muestran las estructuras celulares más claramente que sin ella (imagen superior), lo que permite un análisis de las imágenes más sólido.
La opción confocal digital define los picos de intensidad de objetos fluorescentes
Se adquirieron imágenes de células HEK293 que contenían cuerpos nucleares denominados “paraspeckles” con el sistema ImageXpress Micro XL sin (imagen superior) y con opción confocal digital (valor K 0,063) (imagen inferior). Los histogramas de un barrido lineal de imágenes representativas muestran cómo la opción confocal digital puede agudizar los picos de intensidad de los objetos fluorescentes. Se logró un recuento más exacto de los “paraspeckles” cuando se analizaron las imágenes confocales digitales con el módulo de aplicación Granularity del software MetaXpress (derecha).
Notas de aplicación
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Mejore los resultados de los ensayos de translocación nuclear mediante la deconvolución de la imagen
Los ensayos que requieren la identificación precisa de estructuras subcelulares o de moléculas dentro de compartimentos diferentes de la célula pueden beneficiarse de la función de deconvolución de la imagen en tiempo real para mejorar la identificación de la señal de fluorescencia específica contra el fondo potencialmente alto causado por la luz de fuera de foco. Utilizamos el sistema ImageXpress Pico y el software CellReporterXpress para evaluar la traslocación de NF-κB desde el citoplasma al núcleo de células HeLa tras el tratamiento con TNF-α.
Mejore los resultados de los ensayos de translocación nuclear mediante la deconvolución de la imagen
Los ensayos que requieren la identificación precisa de estructuras subcelulares o de moléculas dentro de compartimentos diferentes de la célula pueden beneficiarse de la función de deconvolución de la imagen en tiempo real para mejorar la identificación de la señal de fluorescencia específica contra el fondo potencialmente alto causado por la luz de fuera de foco. Utilizamos el sistema ImageXpress Pico y el software CellReporterXpress para evaluar la traslocación de NF-κB desde el citoplasma al núcleo de células HeLa tras el tratamiento con TNF-α.
Ensayos de adquisición de imágenes de alto rendimiento con pez cebra
El software ImageXpress® proporciona una óptima flexibilidad para adquirir imágenes de alta calidad con un gran campo de visión. El software MetaXpress® permite el análisis de imágenes para una gran variedad de aplicaciones con flujos de trabajo sencillos y, en combinación con el software informático AcuityXpress para la extracción de datos, esta solución tan completa mejora considerablemente el rendimiento del cribado in vivo con pez cebra.
Ensayos de adquisición de imágenes de alto rendimiento con pez cebra
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