El proceso de producción de anticuerpos monoclonales (AcM) tradicional normalmente comienza con la generación de células productoras de AcM (es decir, hibridomas) mediante la fusión de células de mieloma con los esplenocitos productores de anticuerpo deseados (es decir, linfocitos B). Estos linfocitos B proceden en general de animales, normalmente ratones. Tras la fusión celular, se realiza el cribado de grandes cantidades de clones y se seleccionan en función de la especificidad por el antígeno y la clase de inmunoglobulina. Una vez identificadas las líneas celulares de hibridoma candidatas, cada “acierto” se confirma, se valida y se caracteriza mediante una serie de ensayos funcionales posteriores. Tras finalizar, los clones se aumentan de escala donde se producen los bioprocesos posteriores adicionales.

Proceso típico de producción de anticuerpos monoclonales.

Proceso típico de producción de anticuerpos monoclonales

1. Inmunización de ratones y aislamiento de esplenocitos - Los ratones se inmunizan con un antígeno y posteriormente se realiza un cribado de su sangre para detectar la producción de anticuerpos. Los esplenocitos productores de anticuerpo se aíslan para la producción de hibridomas in vitro.
2. Preparación de células de mieloma - Las células de mieloma son células inmortalizadas que, una vez fusionadas con las células del bazo, pueden dar lugar a hibridomas capaces de crecer indefinidamente. Las células de mieloma se preparan para la fusión.
3. Fusión - Las células de mieloma y los esplenocitos aislados se fusionan para formar hibridomas en presencia de polietilenglicol (PEG) que provoca la fusión de las membranas celulares.
4. Cribado y selección de clones - Se realiza el cribado y selección de los clones en función de la especificidad por el antígeno y la clase de inmunoglobulina.
5. Caracterización funcional - Se confirma, valida y caracteriza (p. ej., mediante ELISA) cada colonia potencialmente con una alta producción.
6. Aumento de escala y retirada - Se aumenta la escala de los clones que producen los anticuerpos deseados y se retiran los agentes de selección.
7. Expansión - Se expanden los clones que producen los anticuerpos deseados (p. ej., en biorreactores o matraces grandes).

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Otros enlaces:

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