Producción de plásmidos
Producción de ADN plasmídico fiable: eliminación de fallos en los lotes y aceleración del avance clínico.
¿Qué es un plásmido?
Un plásmido es una pequeña molécula de ADN circular distinta del ADN cromosómico que posee la capacidad única de replicarse de forma independiente. Los plásmidos, esenciales en biología molecular, facilitan la producción de ADN plasmídico, la manipulación y el estudio de genes. La clonación molecular, una técnica utilizada para producir copias idénticas de fragmentos de ADN, está intrínsecamente ligada a la producción de plásmidos. Los plásmidos sirven como vehículo para replicar estos fragmentos de ADN en células bacterianas. Mediante la introducción de un gen de interés en un plásmido, los investigadores pueden producir grandes cantidades de ese gen para su uso en diferentes aplicaciones, salvando de este modo las lagunas en nuestro conocimiento sobre la codificación genética.
Descubra el eslabón fundamental entre la producción de plásmidos y el desarrollo de fármacos. Teniendo en cuenta que la tasa de éxito de los fármacos depende de predicciones exactas, los plásmidos desempeñan un papel crucial en la administración eficiente del ADN para vacunas y terapias génicas, representando soluciones más seguras y ampliables para abordar diferentes enfermedades.
¿Para qué se utilizan los plásmidos?
- Clonación de genes: los plásmidos, ampliamente reconocidos por sus capacidades de clonación, permiten la duplicación de genes específicos. La introducción de un gen de interés en un plásmido permite su propagación dentro de células bacterianas, produciendo grandes cantidades del material genético deseado.
- Vectores de expresión: los plásmidos funcionan como vectores y facilitan la expresión de los genes de interés en una célula huésped específica. Una vez integrado el gen de interés en la molécula de ADN plasmídico, se introduce en el huésped y se estimula su expresión génica.
- Edición génica: aprovechar los plásmidos para edición génica, como CRISPR-Cas9, garantiza la precisión. El plásmido transporta los componentes necesarios para la modificación genética y altera la estructura del ADN de la célula huésped.
- Producción de proteínas: para la producción de proteínas a gran escala, los plásmidos incluyen el gen necesario, estimulando a la célula huésped a generar la proteína codificada.
- Descubrimiento de fármacos: los plásmidos, parte integral del descubrimiento de fármacos, son vehículos fundamentales de los genes terapéuticos utilizados en terapia celular y génica, así como en vacunas de ARNm. La producción eficiente de plásmidos es primordial para cubrir las crecientes demandas de tratamientos del mercado.
Anatomía de una célula bacteriana que muestra su estructura, donde residen y se replican los plásmidos (pequeñas moléculas de ADN circular). Este ambiente procariota es fundamental para la producción del ADN plasmídico, una piedra angular en biología molecular e investigación genética.
Flujo de trabajo de clonación molecular para la producción de ADN plasmídico
- Diseño estratégico: en el proceso de diseño estratégico para clonación, el paso inicial implica optimizar la estrategia de clonación, incluida la selección de las enzimas de restricción y los vectores adecuados, así como el diseño de los cebadores para la amplificación génica, a la vez que se optimizan simultáneamente las condiciones de la PCR.
- Preparación de la muestra: posteriormente, se prepara la muestra de ADN, proceso que comprende tareas como la extracción de ADN, la amplificación génica mediante PCR y la purificación de los fragmentos de ADN.
- Digestión enzimática: a continuación, los fragmentos de ADN se someten a digestión con enzimas de restricción, un proceso que puede automatizarse con sistemas de pipeteo robóticos.
- Ligaciones: estos fragmentos de ADN se ligan después a un vector compatible usando una reacción de ligación automatizada, facilitada por sistemas como el pipeteo robótico o robots de manipulación de líquidos.
- Transformación: posteriormente, el ADN ligado se transforma en células competentes por medio de sistemas de electroporación automáticos, empleando equipos especializados, como electroporadores o dispositivos microfluídicos.
- Siembra en placas: las células transformadas encuentran su lugar en medios selectivos a través de un sistema automático de siembra en placas, como el selector de colonias microbianas QPix®, que favorecen el crecimiento de las colonias recombinantes.
- Cribado y selección: después, estas colonias se criban y seleccionan automáticamente en nuestro selector de colonias microbianas QPix®.
- Secuenciación: los clones que pasan la fase de cribado se someten a una secuenciación de ADN automática para confirmar el éxito de la clonación del fragmento de ADN deseado.
- Análisis de los datos: los datos de secuenciación se analizan usando herramientas de software automatizadas, que no solo identifican, sino que también anotan los fragmentos de ADN clonados y sus secuencias.
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Esta plataforma automatizada está diseñada para los investigadores con el objetivo de simplificar su proceso de preparación de plásmidos. Nuestra configuración de automatización básica, perfecta para lograr un rendimiento bajo a medio con protocolos validados, tiene la posibilidad de ampliarse. Características:
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PLÁSMIDOS AAV
Profundicemos en el intrincado flujo de trabajo de los plásmidos AAV, una piedra angular en la bioproducción. El virus adenoasociado (AAV) destaca por su mínima replicación y su baja inmunogenicidad en seres humanos. Este proceso abarca todo, desde la construcción del vector de ADN de AAV y la expansión del plásmido a la purificación y transducción de las células de mamífero. Descubra los pasos de precisión, desde la optimización de las condiciones de cultivo hasta el cribado de clones de alto rendimiento.
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Aplicaciones y métodos para la producción de ADN plasmídico
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Flujo de trabajo automatizado para la producción de plásmidos
En la producción de ADN plasmídico, el gen diana es clave para la eficiencia de la clonación molecular. Nuestras soluciones de automatización de laboratorios mejoran su flujo de trabajo de clonación de plásmidos, desde el aislamiento del ADN a la selección de colonias. Adaptamos los sistemas de producción de plásmidos a las necesidades de biotecnología actuales y futuras. Con experiencia en técnicas de clonación molecular, integramos tecnología puntera en su proceso. Proporcionamos asistencia continua, garantizando la adaptación a las demandas de producción de plásmidos en constante evolución.