Detección, cuantificación y análisis de proteínas
Optimización del proceso de cuantificación de proteínas
Detección, cuantificación y análisis de proteínas
La detección, cuantificación y análisis de proteínas son cruciales para investigar una gran variedad de procesos biológicos. La medición de la concentración de proteína es necesaria en procesos que abarcan desde la purificación y marcaje de proteínas hasta la preparación de muestras para electroforesis.
La cuantificación de proteínas es la medición de la concentración de proteína total en una muestra. Las proteínas se pueden cuantificar directamente mediante absorbancia a 280 nm, o indirectamente mediante métodos colorimétricos (BCA, Bradford, etc.) o fluorimétricos que ofrecen ventajas como una mayor sensibilidad. Para identificar y medir una proteína específica dentro de una muestra compleja, por ejemplo, suero o lisado celular, puede utilizarse un ensayo de inmunoadsorción ligado a enzima (ELISA).
La señalización celular y otros procesos biológicos pueden analizarse usando proteínas fluorescentes. Por ejemplo, la proteína fluorescente verde (GFP) puede expresarse en células vivas y utilizarse para visualizar la localización y la dinámica de proteínas en condiciones experimentales. El triptófano, un aminoácido cuyas propiedades de emisión de fluorescencia se ven afectadas por su microambiente, también se ha utilizado para obtener información sobre los cambios en el estado conformacional de las proteínas.
Métodos de cuantificación y análisis de proteínas
Los lectores de microplacas con modos de detección de absorbancia, fluorescencia y luminiscencia proporcionan una solución versátil para la cuantificación y el estudio de proteínas. Nuestras notas de aplicaciones demuestran cómo se pueden usar estos instrumentos para obtener y analizar resultados.