SEMBRAR LAS CÉLULAS
Sembrar las células adherentes o en suspensión en el material de laboratorio de elección, como placas de cultivo, portaobjetos con cámara y microplacas. Incubar las células en la condiciones de cultivo normales (es decir, 37 °C, 5 % de CO2). En el caso de células adherentes, la incubación de las células sembradas durante toda la noche dará tiempo para que las células se adhieran y crezcan.
Placas de 96 o 384 pocillos
La mayoría de los cultivos celulares para el cribado de alto contenido y alto rendimiento se realizan en microplacas de 96 o 384 pocillos.
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Kits de ensayo de viabilidad celular EarlyTox
TRATAR CON COMPUESTOS
Si es necesario para el protocolo, tratar las células con los compuestos de interés.
Los compuestos se pueden añadir a las células desde durante minutos a varios días, dependiendo del mecanismo de acción de los compuestos y la respuesta biológica que se esté investigando. Por ejemplo, los ensayos de apoptosis o de internalización de receptores requieren generalmente periodos de incubación más cortos, mientras que los ensayos de citotoxicidad multiparamétricos requieren periodos más largos. Los tratamientos más largos con compuestos pueden requerir la sustitución de los compuestos durante la incubación.
TEÑIR CON MARCADORES
Las células vivas se pueden teñir con diversos fluoróforos o ser transfectadas/transducidas con construcciones que contengan fusiones de péptido-proteína fluorescentes. Para la tinción se deben seguir las instrucciones del fabricante. La tinción no es necesaria para todas las aplicaciones con células vivas; la adquisición y análisis de imágenes de células sin marcar permite el seguimiento y monitorización de las células solo en campo claro.
Kits de ensayo
Kits de ensayo sólidos y fáciles de usar para investigación en ciencias biológicas, descubrimiento y desarrollo de fármacos y bioensayos. Nuestros kits de ensayo se han optimizado para su uso con nuestros instrumentos. Se pueden realizar cribados de más compuestos en fases más tempranas del descubrimiento de fármacos y permitir la caracterización de un perfil completo de concentración-respuesta de compuestos problema.
Adquisición de imágenes de alto contenido ImageXpress, catálogo
Nuestros sistemas para la adquisición y análisis de imágenes de alto contenido proporcionan una adaptabilidad flexible facilitando la evolución de su sistema a la par que su investigación. Cuentan con opciones y módulos para abordar su investigación específica, lo que incluye objetivos, filtros, modos de adquisición de imágenes y condiciones del entorno.
CONFIGURAR LOS AJUSTES DE CONTROL DEL ENTORNO
Tras la adición de las tinciones y los compuestos, colocar la placa en el instrumento de adquisición de imágenes adecuado integrado con funciones de control del entorno, como gases (CO2, O2), temperatura y humedad.
Para ensayos de lapso de tiempo a largo plazo es esencial mantener un entorno fisiológico natural para garantizar la salud de las células vivas y evitar la desviación del enfoque durante la adquisición de lapso de tiempo.
ADQUIRIR LAS IMÁGENES DE CÉLULAS VIVAS
Para adquisiciones de lapso de tiempo continuas, configurar la longitud total de tiempo para la serie temporal y los intervalos de adquisición de imágenes, es decir, tomar imágenes cada hora durante 24 horas.
Se pueden realizar adquisiciones de lapso de tiempo discontinuas en las que la placa se pone en el incubador y se saca de él para adquirir imágenes en diferentes puntos temporales.
Sistema de adquisición automática de imágenes celulares
El sistema de adquisición automática de imágenes celulares ImageXpress® Pico es más que un microscopio digital; combina la adquisición de imágenes de alta resolución con un potente análisis. Ya sea realizando ensayos en campo claro o adquiriendo imágenes de fluorescencia, el generador de imágenes automático cuenta con protocolos preconfigurados completos para ensayos con células que permiten acortar la curva de aprendizaje, de modo que pueda comenzar a realizar experimentos rápidamente.
Software de adquisición y análisis de imágenes celulares
El software de adquisición y análisis automáticos de imágenes CellReporterXpress funciona con los sistemas ImageXpress® Pico. Tiene una interfaz limpia y fácil de usar para la realización del análisis cuantitativo de imágenes adquiridas con microscopía automatizada. El software permite el análisis distribuido de imágenes para un mayor rendimiento y es perfecto para ampliar la adquisición de imágenes de microscopía con portaobjetos y microplacas.
ANALIZAR LAS IMÁGENES DE CÉLULAS VIVAS
Analizar las imágenes con el software de análisis de imágenes celulares para generar lecturas multiparamétricas de las respuestas biológicas que se están estudiando. Los datos cinéticos se pueden generar y revisar para las adquisiciones de lapso de tiempo.