Lectores de microplacas multimodo SpectraMax Serie M

Absorbancia

Descubra todo sobre la detección de absorbancia: cómo funciona, cómo se mide y cómo se puede usar para calcular concentraciones. También proporcionamos información sobre aplicaciones y ensayos comunes de absorbancia, como ELISA, cuantificación de proteínas y ácidos nucleicos y proliferación microbiana.

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Salud celular

El concepto de viabilidad celular hace referencia a la cantidad de células sanas en una población y puede evaluarse utilizando ensayos que permitan determinar la actividad enzimática, la integridad de la membrana celular y la producción de ATP, entre otros indicadores. Estos métodos pueden utilizar lecturas de luminiscencia, fluorescencia o colorimetría como indicadores de la viabilidad celular general o incluso de vías celulares específicas. A menudo se utilizan ensayos de citotoxicidad y viabilidad celular para evaluar el efecto de un fármaco u otro tratamiento, y son herramientas valiosas para la búsqueda de nuevos tratamientos, así como para avanzar en nuestro conocimiento de la función de las células normales.

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Viabilidad celular

La viabilidad celular se puede evaluar examinando parámetros como la integridad de la membrana celular o la actividad de enzimas celulares. En un lector de microplacas, estos parámetros se pueden detectar utilizando reactivos fluorescentes. Por ejemplo, un colorante rojo de unión a ADN impermeable a células solo tiñe células muertas o dañadas cuyas membranas están afectadas, mientras que un colorante verde de células vivas solo emite fluorescencia cuando las enzimas metabólicas están activas.

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Señalización celular

La señalización celular permite a las células responder a su entorno y comunicarse con otras células. Las proteínas localizadas en la superficie celular pueden recibir las señales del entorno y transmitir la información al interior de la célula mediante interacciones entre proteínas y reacciones bioquímicas que constituyen una vía de señalización. Los organismos multicelulares dependen de una amplia gama de vías de señalización para coordinar el crecimiento, la regulación y el funcionamiento adecuados de las células y los tejidos. Si se produce una desregulación de la señalización inter o intracelular, las respuestas celulares inadecuadas podrían dar lugar a cáncer y a otras enfermedades.

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ELISA

Los ensayos de inmunoadsorción ligados a enzima (ELISA) se utilizan para medir la cantidad de una proteína específica, usando un formato de microplaca, y los resultados se detectan frecuentemente a través de la absorbancia en el rango de longitudes de onda visibles. Los formatos de ELISA quimioluminiscentes y fluorescentes ofrecen sensibilidad mejorada para una cuantificación exacta de analitos menos abundantes.

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Fluorescencia

Todo sobre la detección de fluorescencia: qué es, cómo funciona y los instrumentos utilizados para medir la fluorescencia en una muestra. También se incluyen muchos ensayos con fluorescencia, como viabilidad celular, actividad de GPCR y cuantificación de ácidos nucleicos fluorescentes.

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Polarización de fluorescencia (PF)

La polarización de fluorescencia (PF) es una técnica muy utilizada para monitorizar eventos de unión en solución. Se puede utilizar para evaluar interacciones biomoleculares, como la unión proteína-anticuerpo y la hibridación de ADN, así como la actividad enzimática, y se ha adaptado a investigación básica y cribado de alto rendimiento.

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Detección de proteínas fluorescentes

Las proteínas fluorescentes se han hecho enormemente populares como herramientas para la monitorización de eventos biológicos in vivo. Además de la proteína fluorescente verde (GFP) de la medusa Aequorea victoria, actualmente existen otras muchas proteínas disponibles de otras especies de medusa y de arrecifes de coral. Estas proteínas se pueden expresar en una variedad diversa de células y organismos, donde se utilizan para el seguimiento de muchos procesos celulares, como la síntesis y translocación de proteínas, inducción génica y linaje celular.

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Luminiscencia

Más información sobre la detección de luminiscencia: qué es, cómo funciona y las ventajas de la luminiscencia sobre otros modos de detección. Cubriremos los principales ensayos con luminiscencia, como ensayos con gen indicador de luciferasa doble, ELISA quimioluminiscente, citotoxicidad y BRET.

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Microbiología y contaminante

Se estima que los microorganismos, incluidas las bacterias, constituyen aproximadamente el 15 por ciento de la biomasa de la tierra y, en el cuerpo humano, superan a las células humanas en una proporción de 10 a 1. Estos microorganismos representan un gran beneficio para nosotros y también son vitales en muchos campos de investigación, desde la medicina a la producción de energías alternativas. Por otro lado, es necesario el control de los microorganismos y las sustancias tóxicas que producen para garantizar la seguridad de los productos farmacéuticos. Los científicos cuya investigación se basa en células de mamíferos deben controlar cuidadosamente estos cultivos en busca de contaminantes microbianos no deseados para asegurarse de que sus resultados experimentales sean fiables.

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Cuantificación y análisis de ácidos nucleicos (ADN/ARN)

Los ácidos nucleicos son biomoléculas grandes comunes para todas las formas de vida. El ácido desoxirribonucleico (ADN) consta de una cadena doble de pares de nucleótidos, mientras que el ácido ribonucleico (ARN) normalmente está formado por una cadena sencilla. En el ADN, los nucleótidos son adenina, citosina, guanina y timina, mientras que el ARN contiene uracilo en lugar de timina. El ADN constituye el material genético de todos los organismos, que codifica la información que las células necesitan para sintetizar las proteínas.

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Detección, cuantificación y análisis de proteínas

La detección, cuantificación y análisis de proteínas son cruciales en la investigación de una gran variedad de procesos biológicos. La medición de la concentración de proteína es necesaria en procesos que abarcan desde la purificación y marcaje de proteínas hasta la preparación de muestras para electroforesis. Las proteínas se pueden cuantificar directamente mediante absorbancia a 280 nm, o indirectamente mediante métodos colorimétricos (BCA, Bradford, etc.) o fluorimétricos que ofrecen ventajas como una mayor sensibilidad. Para identificar y medir una proteína específica dentro de una muestra compleja, por ejemplo, suero o lisado celular, puede utilizarse un ELISA.

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Genotipado de SNP

El genotipado es un proceso para analizar las diferencias genéticas entre individuos mediante el examen de sus secuencias de ADN. Los polimorfismos de nucleótido único (single nucleotide polymorphyms, SNP) son uno de los tipos más frecuentes de variación genética que consiste en la mutación de un único nucleótido en un locus específico. Se ha demostrado que el genotipado de SNP es muy útil para la identificación de mutaciones relacionadas con enfermedades en diferentes especies y, como consecuencia, se han desarrollado muchas técnicas para la detección de SNP.

• Detecte SNP con la tecnología de genotipado KASP en lectores de microplacas SpectraMax

TRF, TR-FRET y HTRF

Todo sobre la fluorescencia resuelta en el tiempo, ensayos de TRF, TR-FRET y HTRF. Proporcionaremos recursos de aplicaciones para ayudarle en su investigación, como ensayos de quinasas, vías de señalización celular, interacciones proteína-proteína, citotoxicidad celular y más.

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