En la Universidad de Londres utilizan el lector SpectraMax i3x y el sistema FLIPR Tetra para desarrollar medicamentos personalizados
“Mi investigación está muy enfocada en mejorar nuestra comprensión de la base molecular de la salud y la enfermedad y mi trabajo se centra principalmente en dilucidar el papel de los receptores de la superficie celular en estos procesos”.
Andrea Townsend-Nicholson
COMPAÑÍA/UNIVERSIDAD
Departamento de Biología Estructural y Molecular de la University College de Londres
MIEMBROS DEL EQUIPO
Profesora Andrea Townsend-Nicholson
PRODUCTOS UTILIZADOS
Sistema de cribado celular de alto rendimiento FLIPR
Lector de microplacas multimodo SpectraMax i3x
El reto
La profesora Andrea Townsend-Nicholson está interesada en la medicina personalizada, ayudando a desarrollar tratamientos a medida para las personas.
La investigación en el grupo de Andrea se centra principalmente en entender cómo las señales extracelulares se transducen en respuestas intracelulares. En particular, en dilucidar el papel de los receptores de la superficie celular de estos procesos. Utilizan un enfoque integrado de trabajo experimental e informático de alto rendimiento para desarrollar fármacos que pueden actuar en receptores de la superficie celular específicos. Este enfoque les permite desarrollar modelos informáticos de la estructura del receptor diana para cada paciente, incluyendo cualquier mutación o variación genómica en su secuencia proteica. Pueden analizar los compuestos que desarrollan tanto in silico como experimentalmente. La idea es reducir el coste y el tiempo hasta llegar al uso clínico de cada nuevo fármaco haciendo la mayor parte del trabajo pesado a nivel informático y luego verificándolo a nivel experimental para asegurarse de que todo funcione como se espera. Actualmente están desarrollando una “píldora para adelgazar” antiobesidad utilizando este método. El equipo también está interesado en el desarrollo de nuevas tecnologías, especialmente en el uso de la ingeniería tisular para desarrollar arquitecturas biológicas 3D para uso terapéutico.
Para su investigación de los receptores de la superficie celular, el equipo necesitaba una solución de alto rendimiento para monitorizar la movilización del calcio por los GPCR y los canales iónicos, así como los cambios en el potencial de membrana asociados con la activación de canales iónicos y las proteínas transportadoras de iones.
La solución
El equipo realiza los ensayos de potencial de membrana y señalización del calcio utilizando el sistema de cribado celular de alto rendimiento FLIPR® Tetra. El sistema FLIPR también se utiliza para realizar ensayos de cAMP utilizando subunidades quiméricas de proteína G que reconocen receptores acoplados a Gi o Gs, pero activan PLCβ, en lugar de interaccionar con la adenilil ciclasa.
Como vía alternativa de medir el cAMP, el grupo realiza ensayos de hTR-FRET de cAMP en un lector de microplacas multimodo SpectraMax i3x. Este sistema también se utiliza para cuantificar el ADNbc para la secuenciación de nueva generación Illumina usando los kits de ensayo SpectraMax Quant dsDNA. Además, estos kits se utilizan para la docencia de estudiantes de medicina y de biociencia molecular como parte de los proyecto Microbioma Humano y Microbioma de la Tierra.
Lector de microplacas multimodo SpectraMax i3x
Sistema de cribado celular de alto rendimiento FLIPR Penta
Productos utilizados
Transforme rápidamente sus conceptos creativos en ensayos celulares cinéticos en tiempo real para identificar cabezas de serie preliminares contra dianas en GPCR y canales iónicos. El sistema FLIPR Tetra, muy reconocido en el sector, es rápido, fiable y sumamente fácil de configurar. El sistema está optimizado para su uso tanto con fluorescencia como con luminiscencia y se adapta fácilmente a su formato de ensayo con cabezales para 96, 384 y 1536 pocillos intercambiables por el usuario.
El lector de microplacas multimodo SpectraMax i3x mide absorbancia, fluorescencia y luminiscencia con actualizaciones disponibles que incluyen inmunotransferencia, adquisición de imágenes celulares y cinética rápida con inyectores más modos de detección adicionales. Los módulos de detección configurables por el usuario proporcionan la capacidad para explorar las vías celulares y la expresión de proteínas.
Los resultados
Estas soluciones han sustentado los avances no solo en la investigación de Andrea, sino también en su trabajo docente, proporcionando un medio para que los jóvenes investigadores incorporen ensayos de alto rendimiento en su trabajo.
El grupo de Andrea está también involucrado en la validación del kit de ensayo FLIPR Potassium. Con su sistema FLIPR Tetra, demostraron que estos kits podían utilizarse para medir la actividad funcional del cotransportador de cationes-cloruro KCC2 humano empleando un protocolo homogéneo sin lavado. En comparación con los colorantes tradicionales, como BTC-AM, demostraron que el protocolo simplificado y la calidad del ensayo sólido, en combinación con la capacidad de alto rendimiento del sistema FLIPR Tetra, proporcionan una potente solución para el cribado de moduladores del cotransportador hKCC2.
Recursos relacionados
Nota de aplicación
Desarrollo de un ensayo de transportador potasio-cloruro con células usando el kit de ensayo FLIPR Potassium